引物與qPCR檢測(cè)有什么關(guān)系？

引物在實(shí)時(shí)定量聚合酶鏈反應(yīng)（quantitative PCR，qPCR）中扮演著重要的角色。引物的設(shè)計(jì)質(zhì)量直接影響著實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性和可靠性。

特異性檢測(cè)：

引物的主要作用是在DNA的特定區(qū)域結(jié)合并擴(kuò)增目標(biāo)序列。良好設(shè)計(jì)的引物對(duì)于特異性至關(guān)重要，確保只擴(kuò)增目標(biāo)DNA，而不受其他非特定序列的影響。

靈敏度：

引物的選擇直接影響著 qPCR 檢測(cè)的靈敏度。優(yōu)秀的引物設(shè)計(jì)可以保證低濃度的目標(biāo)DNA也能被可靠地?cái)U(kuò)增和檢測(cè)，從而提高實(shí)驗(yàn)的靈敏度。

準(zhǔn)確性：

正確選擇的引物可以減少假陽(yáng)性和假陰性結(jié)果的風(fēng)險(xiǎn)，確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。

效率：

引物的設(shè)計(jì)還會(huì)影響擴(kuò)增的效率，良好設(shè)計(jì)的引物能夠在合適的溫度下快速擴(kuò)增目標(biāo)序列，提高實(shí)驗(yàn)效率。

引物的設(shè)計(jì)和選擇是 qPCR 實(shí)驗(yàn)中至關(guān)重要的一環(huán)，直接關(guān)系到實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。在進(jìn)支原體qPCR檢測(cè)過(guò)程中，引物的選擇也十分重要。德國(guó)MB支原體檢測(cè)試劑盒Venor?GeM qEP，預(yù)混液中包含引物，幫助支原體檢測(cè)項(xiàng)目完成方法學(xué)驗(yàn)證。

Venor?GeM qEP利用定量、實(shí)時(shí)PCR (qPCR)快速(約3小時(shí))和可靠的篩選細(xì)胞培養(yǎng)上清支原體污染。該試劑盒可與多種類型的實(shí)時(shí)PCR循環(huán)器結(jié)合使用，能夠檢測(cè)熒光染料FAM?和HEX?。

德國(guó)MB公司生產(chǎn)的支原體qPCR檢測(cè)試劑盒有以下優(yōu)點(diǎn)：

①經(jīng)典法qPCR試劑盒遵循歐洲藥典流程要求

②高特異性，一次檢測(cè)即可涵蓋了所有可能感染細(xì)胞的支原體物種（涵蓋歐洲藥典規(guī)定的9種支原體），根據(jù)序列一致性，至少可以檢測(cè)到107種支原體物種。操作簡(jiǎn)單，易于觀察（使用MB的試劑盒，下表中列出的支原體物種均為陽(yáng)性，其他微生物或真核細(xì)胞均為陰性，無(wú)交叉反應(yīng)）。

高靈敏度，MB公司的支原體qPCR檢測(cè)試劑盒經(jīng)典法檢測(cè)限可達(dá)到≤10CFU/ml。

MB公司的支原體qPCR檢測(cè)試劑盒一步法最低檢測(cè)限≥50個(gè)基因組/反應(yīng)。

④MB公司有相應(yīng)配套的10CFU/100CFU的敏感度測(cè)試的標(biāo)準(zhǔn)品，便于方法學(xué)驗(yàn)證。

⑤MB公司有相應(yīng)配套的支原體基因組DNA和細(xì)菌基因組DNA，便于特異性驗(yàn)證。

⑥MB公司有相應(yīng)配套的支原體絕對(duì)定量標(biāo)準(zhǔn)品，便于最后定量檢測(cè)。