聚合酶鏈式反應和實時熒光定量PCR的區別是什么

聚合酶鏈式反應vs實時熒光定量PCR

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發表時間:2024-03-14 16:08

聚合酶鏈式反應(PCR)和實時熒光定量PCRqPCR)在原理、操作方式、數據分析以及靈敏度等方面存在顯著的區別。

原理:PCR是一種體外擴增DNA的方法,通過變性、退火和延伸三個基本步驟,實現對特定DNA片段的放大擴增。而qPCR則是在PCR基礎上引入熒光基團,通過實時監測熒光信號的變化來準確測量起始模板的數量。

操作方式:PCR在反應結束后,通常需要進行凝膠電泳等后處理來分析擴增產物。而qPCR則可以在反應過程中實時監測熒光信號的強度,無需額外的后處理步驟。

數據分析:PCR的結果通常是判斷目標序列是否擴增成功,而qPCR通過熒光信號強度的變化,能夠定量測量起始DNA模板的數量。通過與已知濃度的標準曲線比較,可以確定初始模板的數量,從而實現對目標序列的定量分析。

靈敏度:由于qPCR能夠實時監測熒光信號的變化,因此通常比傳統PCR更為靈敏,可以檢測低濃度的DNA模板。

總的來說,PCRqPCR各有其特點和適用場景。PCR主要用于定性分析,判斷目標序列是否擴增成功;而qPCR則更適用于定量分析,能夠精確測量起始DNA模板的數量。在實際應用中,可以根據具體需求選擇合適的方法。


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