細胞支原體檢測試劑盒PCR法使用方法

支原體不同于細菌，也不同于病毒，種類繁多，分布廣泛，造成的危害相當大，涉及人、動物、植物及昆蟲等多個領域，給人類健康和科研工作帶來不利影響。在科研基礎細胞實驗中很有必要對新引進的細胞和實驗過程中的細胞株使用細胞支原體檢測試劑盒對其進行支原體檢測。

北京締一生物科技有限公司國內總代理的德國MB產品細胞支原體檢測試劑盒PCR法（經典法）(含Taq酶） Venor Gem Classic

細胞支原體檢測試劑盒PCR法（經典法）(含Taq酶）特點

1.內控對照為獨立包裝，遵循歐洲藥典和日本藥典操作流程。

2.高特異性，僅一條陽性對照條帶，即可涵蓋所有可能感染細胞的支原體物種。操作簡單，

易于觀察。

3.高靈敏度，若PCR反應體系加入10μl樣本，支原體檢測限度為≤5或≤10CFU。

4.歐洲藥典要求的26種支原體均可檢出。該試劑盒可檢測出1種脲原體、7種無膽甾原體和85種支原體，與細菌和真核DNA無交叉反應。

5.試劑盒內包含Taq酶，無需另外購買。

細胞支原體檢測試劑盒PCR法（經典法）(含Taq酶）操作步驟

第1步：樣本處理

a.細胞培養上清

b.生物藥或需遵循藥典的樣本

說明：①樣品基質可能會影響檢測的靈敏度。收集和篩選更高的樣品量可提高測定靈敏度。

    ②細胞培養物樣本含豐富的DNA酶，在低溫下也能降解支原DNA，影響檢測靈敏度。

建議：樣本做DNA抽提處理，實現最高靈敏度。

推薦：德國MB公司生產的專用支原體DNA提取試劑盒Venor? Gem Sample Preparation Kit該DNA抽提試劑盒已經過廣泛驗證。

第2步：試劑制備

第3步：PCR體系建立

a. 細胞培養上清

b.生物藥或需遵循藥典的樣本

第4步：啟動PCR反應

第5步：電泳結果分析

191bp為內控對照條帶，表明PCR反應正常。 當樣本存在支原體污染時，由于內控對照與支原體DNA存在競爭，內控對照條帶變弱（例如支原體DNA＞10^3拷貝）。 陽性對照中支原體DNA＞

10^4拷貝，內控對照條帶會完全消失。 可能在80-90bp存在引物自退火形成的條帶，此條帶不影響檢測結果。 如果待測樣本對PCR產生抑制，則內控對照條帶變弱（和陰性對照相比），此時應先進行DNA抽提（推薦使用：Venor? Gem Sample Preparation Kit 支原體DNA抽提試劑盒，詳見第25頁），然后再檢測。

儲存條件

2~8℃至少6個月。復溶后在-18℃保存。

北京締一生物科技有限公司國內總代Ausbian品牌,德國Minerva-Biolabs微生物污染控制系列。細胞培養實驗使用的Ausbian澳洲進口特級胎牛血清,新生牛血清，干細胞培養基,馬血清，德國MB支原體檢測/祛除試劑盒,DNA污染祛除試劑,支原體PCR/qPCR定量試盒等產品。歡迎訪問締一生物官網：www.276mk.com。聯系電話:4006661688。