支原體標準品收到貨后應該注意什么？

歐洲藥典第2.6.7章（EP 2.6.7）以及《日本藥典》第G3章（JP G3），詳細描述了如qPCR等方法的、基于核酸擴增技術（NAT）的支原體檢測。這些藥典中指出，如果需要用NAT法替代傳統方法，則要求顯示每毫升樣品體積(CFU/ml)中10個菌落形成單位的檢測，即靈敏度達到10CFU/ml。這種靈敏度驗證是方法驗證的一條必經之路。

然而，由于有一些細胞培養實驗室、研究機構、生產線不配備符合支原體培養條件的標準化微生物實驗室，很難實現在實驗室中培養或處理活的、靈敏度測試的支原體菌落。10CFU靈敏度標準品（不可逆滅活的支原體）便應運而生。為了保障滅活菌株的使用效果，德國Minerva Biolabs潛心研制，將先進的凍干粉技術用于支原體檢測標準品的生產過程中，盡可能保障其運輸過程中不被破壞，能夠幫助科研人員實現更高靈敏度的檢測驗證。

產品雖好，但也需要配合科學的使用方法才能事半功倍。本期內容，說一下收到支原體檢測標準品后應該注意什么。

開箱檢查

德國Minerva Biolabs公司生產的標準品系列：

10 CFU Mycoplasma Sensitivity Standards：10 CFU支原體檢測限標準品

100 CFU Mycoplasma Sensitivity Standards：100 CFU支原體檢測限標準品

Quantification Standards DNA：支原體絕對定量標準品

Genomic DNA extracts：支原體基因組DNA

均在冷鏈環境下（2-8℃）運輸，收到貨物后，應盡快查看產品狀態，例如：包裝是否破損、管壁是否發生開裂等。若不會立刻進行實驗，需將標準品再次放入2-8℃保存。

標準品溫度平衡

標準品在不同溫度下，可能會表現出不同的特性，忽略溫度平衡可能會導致實驗結果的不穩定性。

因此，在復溶前需對標準品進行溫度平衡處理，以降低因溫度突變引起的損壞或變性的可能性，使標準品溫度逐漸接近溶解時的溫度，減少溫度變化造成的不良影響，避免基質溫度過低導致凍干粉溶解困難，保證標準品在復溶過程中，保持穩定性和活性，提高實驗靈敏度。

在復溶前，需要將標準品從2-8℃環境中轉移至室溫環境下，對其進行溫度平衡，待所有成分與室溫一致時，才可進行下一步操作。

溫度平衡好后，將標準品放入低速離心機內，短暫離心，通過旋轉，將附著在管壁的凍干粉末甩至瓶底，保障復溶后物質濃度穩定。

小心打開標準品離心管，沿管壁向每個離心管中，加入經過室溫平衡的待檢樣品的同款基質1ml，室溫孵育5分鐘。不建議用移液器反復吹打，容易造成試劑的浪費。孵育好后，可以漩渦10秒，然后再低速離心機內旋轉5秒，將管壁的液體甩下去。