熒光定量PCR和熒光定量探針有什么區(qū)別

熒光定量PCR  vs 熒光定量探針

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發(fā)表時(shí)間:2024-05-06 16:21

熒光定量PCRQuantitative Real-time PCR)和熒光定量探針在概念和應(yīng)用上有一定的區(qū)別。

熒光定量PCR是一種通過(guò)實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)PCR擴(kuò)增過(guò)程中熒光信號(hào)的變化,對(duì)初始模板進(jìn)行定量分析的技術(shù)。它利用熒光染料或熒光探針來(lái)標(biāo)記PCR產(chǎn)物,并通過(guò)檢測(cè)熒光信號(hào)的強(qiáng)度來(lái)反映PCR產(chǎn)物的數(shù)量。這種方法具有高靈敏度、高特異性和高通量的優(yōu)點(diǎn),廣泛應(yīng)用于病原體檢測(cè)、基因表達(dá)分析、轉(zhuǎn)基因拷貝數(shù)分析等領(lǐng)域。

而熒光定量探針是熒光定量PCR中使用的一種特殊探針,它通常是一個(gè)寡核苷酸序列,兩端分別標(biāo)記有報(bào)告熒光基團(tuán)和淬滅熒光基團(tuán)。在PCR擴(kuò)增過(guò)程中,當(dāng)探針與特定序列結(jié)合時(shí),熒光信號(hào)會(huì)被淬滅;而當(dāng)探針被Taq酶切割時(shí),報(bào)告熒光基團(tuán)和淬滅熒光基團(tuán)分離,從而釋放出熒光信號(hào)。這種方法的特異性更高,可以檢測(cè)特定序列的擴(kuò)增產(chǎn)物的量。

因此,熒光定量PCR是一種技術(shù)方法,而熒光定量探針是實(shí)現(xiàn)這一技術(shù)方法所需的一種特殊試劑。在熒光定量PCR中,可以選擇使用熒光染料或熒光探針來(lái)標(biāo)記PCR產(chǎn)物,而熒光定量探針則提供了更高的特異性。

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