細胞房支原體污染怎么快速解決?

怎么快速解決細胞房支原體污染

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發表時間:2024-11-22 15:28

細胞房支原體污染是一個需要迅速解決的問題,以下是一些快速解決細胞房支原體污染的方法:

一、確認污染并終止試驗

觀察細胞形態:支原體污染可能導致細胞形態改變,如細胞形狀不規則、細胞大小不一等。通過觀察細胞形態,可以初步判斷是否存在支原體污染。

檢測支原體:采用PCR檢測、酶聯免疫吸附試驗(ELISA)、熒光抗體法或特異性抗體檢測等方法,確認細胞培養物中是否存在支原體污染。

終止試驗:一旦發現支原體污染,應立即終止相關試驗,避免污染擴散。

二、消除污染

丟棄受污染細胞:將受污染的細胞和培養基、耗材等全部丟棄,防止污染擴散。

清洗和消毒:

使用70%乙醇或其他消毒劑對實驗室設備、器皿等進行全面清洗和消毒。

特別注意清洗和消毒與受污染細胞接觸過的設備,如離心機、培養箱等。可使用Mycoplasma off?支原體祛除噴霧劑就很好用,可以噴于試驗臺、超凈臺、培養箱、液氮罐、移液器、門把手、電話等設備表面。

使用抗生素:在細胞培養過程中,可以添加對支原體敏感的抗生素,如環丙沙星、多西環素、慶大霉素、卡那霉素等,以消除支原體污染。但需要在專業人員的指導下進行,并注意抗生素的濃度和作用時間。

使用支原體清除劑:可使用直接加入培養基使用的Zell Shield?細胞支原體去除劑,Zell Shield?為無菌溶液,無細胞毒性,采用復合支原體敏感抗生素,對大多數細胞株無毒。Zell Shield?通過阻止支原體、真菌、霉菌、致命病菌增殖過程中DNA及蛋白的合成,有效抑制上述微生物的增殖。   

三、防止再次污染

嚴格無菌操作:在進行細胞培養時,應嚴格遵守無菌操作規程,如使用無菌手套、無菌培養皿等。

使用無菌培養基和器材:確保使用的培養基和器材經過無菌處理,且未受到支原體污染。

定期檢測:定期對細胞培養物進行支原體檢測,及時發現并處理污染。

建立污染檢測系統:建立完整的污染檢測系統,記錄每次檢測的結果,以便及時發現和解決問題。

四、其他措施

加熱滅活法:將細胞培養物放入50℃水浴中加熱30分鐘或60℃水浴中加熱15分鐘,可以殺死支原體。但需要注意溫度不能過高,以免對細胞造成損傷。

使用特殊培養基:使用能夠抑制支原體生長和繁殖的特殊培養基進行細胞培養。

UV滅菌:將細胞培養物放置在UV燈下照射一定時間,可以有效地消除支原體污染。但需要注意UV燈的照射強度和時間,以避免對細胞造成損傷。

綜上所述,解決細胞房支原體污染需要采取多種措施,包括確認污染并終止試驗、消除污染、防止再次污染以及其他措施等。只有全面、細致地執行這些步驟,才能有效地解決細胞房支原體污染問題。

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