細(xì)胞房支原體污染怎么快速解決?

怎么快速解決細(xì)胞房支原體污染

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發(fā)表時(shí)間:2024-11-22 15:28

細(xì)胞房支原體污染是一個(gè)需要迅速解決的問(wèn)題,以下是一些快速解決細(xì)胞房支原體污染的方法:

一、確認(rèn)污染并終止試驗(yàn)

觀察細(xì)胞形態(tài):支原體污染可能導(dǎo)致細(xì)胞形態(tài)改變,如細(xì)胞形狀不規(guī)則、細(xì)胞大小不一等。通過(guò)觀察細(xì)胞形態(tài),可以初步判斷是否存在支原體污染。

檢測(cè)支原體:采用PCR檢測(cè)、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)、熒光抗體法或特異性抗體檢測(cè)等方法,確認(rèn)細(xì)胞培養(yǎng)物中是否存在支原體污染。

終止試驗(yàn):一旦發(fā)現(xiàn)支原體污染,應(yīng)立即終止相關(guān)試驗(yàn),避免污染擴(kuò)散。

二、消除污染

丟棄受污染細(xì)胞:將受污染的細(xì)胞和培養(yǎng)基、耗材等全部丟棄,防止污染擴(kuò)散。

清洗和消毒:

使用70%乙醇或其他消毒劑對(duì)實(shí)驗(yàn)室設(shè)備、器皿等進(jìn)行全面清洗和消毒。

特別注意清洗和消毒與受污染細(xì)胞接觸過(guò)的設(shè)備,如離心機(jī)、培養(yǎng)箱等。可使用Mycoplasma off?支原體祛除噴霧劑就很好用,可以噴于試驗(yàn)臺(tái)、超凈臺(tái)、培養(yǎng)箱、液氮罐、移液器、門(mén)把手、電話(huà)等設(shè)備表面。

使用抗生素:在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中,可以添加對(duì)支原體敏感的抗生素,如環(huán)丙沙星、多西環(huán)素、慶大霉素、卡那霉素等,以消除支原體污染。但需要在專(zhuān)業(yè)人員的指導(dǎo)下進(jìn)行,并注意抗生素的濃度和作用時(shí)間。

使用支原體清除劑:可使用直接加入培養(yǎng)基使用的Zell Shield?細(xì)胞支原體去除劑,Zell Shield?為無(wú)菌溶液,無(wú)細(xì)胞毒性,采用復(fù)合支原體敏感抗生素,對(duì)大多數(shù)細(xì)胞株無(wú)毒。Zell Shield?通過(guò)阻止支原體、真菌、霉菌、致命病菌增殖過(guò)程中DNA及蛋白的合成,有效抑制上述微生物的增殖。   

三、防止再次污染

嚴(yán)格無(wú)菌操作:在進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)時(shí),應(yīng)嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作規(guī)程,如使用無(wú)菌手套、無(wú)菌培養(yǎng)皿等。

使用無(wú)菌培養(yǎng)基和器材:確保使用的培養(yǎng)基和器材經(jīng)過(guò)無(wú)菌處理,且未受到支原體污染。

定期檢測(cè):定期對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)物進(jìn)行支原體檢測(cè),及時(shí)發(fā)現(xiàn)并處理污染。

建立污染檢測(cè)系統(tǒng):建立完整的污染檢測(cè)系統(tǒng),記錄每次檢測(cè)的結(jié)果,以便及時(shí)發(fā)現(xiàn)和解決問(wèn)題。

四、其他措施

加熱滅活法:將細(xì)胞培養(yǎng)物放入50℃水浴中加熱30分鐘或60℃水浴中加熱15分鐘,可以殺死支原體。但需要注意溫度不能過(guò)高,以免對(duì)細(xì)胞造成損傷。

使用特殊培養(yǎng)基:使用能夠抑制支原體生長(zhǎng)和繁殖的特殊培養(yǎng)基進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)。

UV滅菌:將細(xì)胞培養(yǎng)物放置在UV燈下照射一定時(shí)間,可以有效地消除支原體污染。但需要注意UV燈的照射強(qiáng)度和時(shí)間,以避免對(duì)細(xì)胞造成損傷。

綜上所述,解決細(xì)胞房支原體污染需要采取多種措施,包括確認(rèn)污染并終止試驗(yàn)、消除污染、防止再次污染以及其他措施等。只有全面、細(xì)致地執(zhí)行這些步驟,才能有效地解決細(xì)胞房支原體污染問(wèn)題。

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