細(xì)菌污染和黑膠蟲污染的區(qū)別是什么

細(xì)菌污染和黑膠蟲污染在細(xì)胞培養(yǎng)中都是常見的問題，但兩者之間存在明顯的區(qū)別。以下是兩者的主要差異：

一、污染來源與特征

細(xì)菌污染：

來源：主要來源于實驗室環(huán)境、實驗人員、實驗服、實驗耗材、共用試劑等。在細(xì)胞培養(yǎng)過程中，即使添加雙抗，也可能因操作不慎而引起污染。

特征：污染后培養(yǎng)基通常在1~2天后會出現(xiàn)渾濁、PH下降變黃。污染初期培養(yǎng)基肉眼觀察無明顯改變，只有在倒置顯微鏡下仔細(xì)觀察才能發(fā)現(xiàn)細(xì)菌。細(xì)菌污染進(jìn)程很快，有的細(xì)胞在培養(yǎng)箱過夜后肉眼就能顯著觀察到渾濁。在顯微鏡下可以觀察到黑點在培養(yǎng)基內(nèi)游動，細(xì)胞變圓或者崩潰，從壁上脫落死亡。

黑膠蟲污染：

來源：黑膠蟲可能是一種寄生于牛血清內(nèi)的原蟲，與草履蟲和變形蟲有類似之處。它們通常在細(xì)胞培養(yǎng)過程中進(jìn)入細(xì)胞房，污染細(xì)胞培養(yǎng)物。

特征：污染后培養(yǎng)液不易變渾濁。在低倍鏡下觀察，培養(yǎng)液和培養(yǎng)基周圍可見黑色顆粒狀或片狀物質(zhì)。在高倍鏡下，這些黑色顆粒會進(jìn)行布朗運動，并且與細(xì)胞數(shù)量呈負(fù)相關(guān)。隨著培養(yǎng)時間的延長，“小黑點”會逐漸增多，且更換培養(yǎng)液或洗滌細(xì)胞無法將其去除。

二、對細(xì)胞的影響

細(xì)菌污染：

細(xì)菌污染對細(xì)胞生長狀態(tài)影響明顯，可能導(dǎo)致細(xì)胞增殖緩慢、形態(tài)改變（如多角、多核等）、細(xì)胞質(zhì)中產(chǎn)生空泡、細(xì)胞不附著等。

細(xì)菌污染進(jìn)程快，有時細(xì)胞在培養(yǎng)箱過夜后就能顯著觀察到污染現(xiàn)象。

黑膠蟲污染：

受黑膠蟲污染的細(xì)胞營養(yǎng)消耗快，需要頻繁更換培養(yǎng)液。

細(xì)胞生長緩慢，狀態(tài)差，空泡化嚴(yán)重，甚至可能導(dǎo)致細(xì)胞形態(tài)的改變和死亡。

三、處理與預(yù)防

細(xì)菌污染：

一旦發(fā)現(xiàn)細(xì)菌污染，應(yīng)立即采取措施清除，如使用細(xì)菌清除劑等。

清除干凈后，必須進(jìn)行傳代并鋪入新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶，且在新瓶中加藥維持一段時間后再撤掉細(xì)菌清除劑，以避免二次污染。

預(yù)防措施包括加強(qiáng)實驗室清潔、消毒，規(guī)范實驗操作，使用無菌耗材和試劑等。

黑膠蟲污染：

黑膠蟲污染的處理相對困難，因為更換培養(yǎng)液或洗滌細(xì)胞無法將其去除。

若污染的細(xì)胞非珍貴且有備用，宜舍棄并復(fù)蘇凍存細(xì)胞或重新購置細(xì)胞培養(yǎng)。

若污染細(xì)胞珍貴且難以替代，可以嘗試使用支原體預(yù)防試劑等預(yù)防措施來減少污染的發(fā)生。

綜上所述，細(xì)菌污染和黑膠蟲污染在污染來源、特征、對細(xì)胞的影響以及處理與預(yù)防方面都存在顯著差異。在細(xì)胞培養(yǎng)過程中，應(yīng)密切關(guān)注污染情況，及時采取措施進(jìn)行處理和預(yù)防。