熒光定量pcr檢測試劑盒原理

熒光定量PCR法簡稱qPCR法，熒光定量pcr檢測試劑盒簡單來說是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上，將針對支原體特異性保守序列的探針做熒光標記，使PCR擴增后的產(chǎn)物帶有熒光，利用熒光信號的變化和配套軟件，進行DNA擴增反應的實時監(jiān)測。今天跟大家介紹的是德國MB產(chǎn)品qPCR支原體檢測試劑盒，也就是熒光定量PCR檢測試劑盒，是已建立的檢測方法，能一次檢測歐洲藥典（EP2.6.7）和日本藥典（JP G3）提到的所有支原體物種，并且能與大多數(shù)儀器配合使用。

qPCR支原體檢測試劑盒針對支原體基因組中的高度保守區(qū)，具有快速、耐用和靈敏的特點。

qPCR支原體檢測試劑盒的設(shè)計滿足歐洲藥典和日本藥典對于不同類型樣本（如軟骨細胞、血清、細胞培養(yǎng)上清）在DNA抽提后的檢測標準。可直接檢測細胞上清（研究領(lǐng)域），或者先對細胞培養(yǎng)物富集，或先抽提DNA。該試劑盒完全符合EP2.6.7和JP G3的要求。

熒光定量pcr檢測試劑盒檢測原理：

該試劑盒擴增柔膜體對應的16S rRNA上的特異序列， 而真核細胞和其他細菌DNA不會被擴增。

qPCR支原體檢測試劑盒說明書同時包括細胞培養(yǎng)上清篩查和遵循歐洲藥典和日本藥典檢查的流程，包括對DNA抽提和對樣本體積的規(guī)定。整個檢測小于3小時。并且與ELISA、熒光染色和培養(yǎng)法不同的是，無須活支原體。和一些生化和細胞學方法相比，PCR具有更高的靈敏度和準確性。

熒光定量pcr檢測試劑盒包含所有必要的PCR組分，內(nèi)控DNA可用于鑒定PCR抑制或DNA抽提問題帶來的假陰性。內(nèi)控DNA可直接加到PCR預混液里，或加到DNA抽提之前的樣本中。它可用于驗證DNA抽提和qPCR擴增過程。它可從Minerva廠家購買（貨號11-9905）。內(nèi)控對照的擴增結(jié)果在560nm檢測（HEX通道），而支原體的擴增在520nm檢測（FAM通道）。

試劑盒包括dUTP，它替代dTTP，方便用尿嘧啶DNA糖基酶（UNG）監(jiān)視假陽性。該試劑盒不包含UNG。

綜上所述，您是不是已經(jīng)對熒光定量pcr檢測試劑盒原理，有所了解。如果還有其他疑問，請咨詢威正翔禹/締一生物資深專家。或者訪問締一生物官網(wǎng)：www.276mk.com。