細胞培養從復蘇細胞開始,澳洲進口特級胎牛血清提高實驗成功率細胞高效解凍的另一個成功秘訣,就是選擇一款優質血清澳洲進口特級胎牛血清! 二維碼
發表時間:2023-03-06 10:39 細胞培養從復蘇細胞開始。怎樣有條不紊的讓細胞從沉寂中醒來?今日就給大家匯總好多個好用小竅門,早點來get! 細胞恢復步驟: 1、將凍存的細胞從液氮罐中取出,馬上放進37°C的沙浴內進行融化,柔和搖晃,加快融化,直至小瓶中只剩下一小塊冰,時間應控制在1min中; 2、用70%酒精擦洗瓶外后轉移無菌操作原則臺灣臺中,擰開瓶蓋前,用酒精噴燈火苗對瓶塞進行清潔; 3、將預加熱新鮮的完全培養基滴進小瓶中。遲緩用移液器汲取瓶內液態至15ml離心管架中,添加適量濃度和體積的完全培養基,柔和攪拌均勻; 4、200×g上下細胞混液離心式5-10min。具體的離心式速度與延續時間因細胞種類而不同。棄掉上清,添加新鮮的完全培養基重懸細胞,并把它轉移至適度的塑造器皿和介紹的塑造環境里。 細胞解凍流程表 常見問題: 1、液氮溫度低,當心超低溫對人會帶來的傷害,在高效液相中存放的冷藏瓶在解凍時存有爆炸風險性,因而,取下凍存管時,要做好防護措施。 2、一般細胞集中化貯藏在液氮中,取時要快速,防止溫度差對于其他凍存細胞產生影響。 3、恢復細胞的核心技術,簡單點來說便是快融,將于37°C沙浴中迅速解凍冷藏細胞<1min。 4、解凍時,凍存管先放進無菌檢測一次性PE手套中,再放入水中融化,防止環境污染也便于實際操作。 5、用加熱完的培養液漸漸地稀釋液解凍的細胞。 6、解凍細胞后,在細胞培養皿中塑造時,應盡可能保持密度高的,以提升細胞成活率。 7、留意無菌操作原則,防止細胞產生環境污染。 細胞高效解凍的另一個成功秘訣,就是選擇一款優質血清! Ausbian澳洲進口特級胎牛血清,在細胞培養中的作用,可以**程度地幫助實驗者提高細胞實驗成功率: 1.提供對維持細胞指數生長的激素,基礎培養基中沒有或量很少的營養物,以及主要的低分子營養物。 2.提供結合蛋白,能識別維生素、脂類、金屬和其他激素等,能結合或調節它們所結合的物質活力。 3.有些情況下結合蛋白質能與有毒金屬和熱原質結合,起到解毒作用。 4.是細胞貼壁、鋪展在塑料培養基質上所需因子來源。 5.起酸堿度緩沖液作用。 6.提供蛋白酶抑制劑,使在細胞傳代時使剩余胰蛋白酶失活,保護細胞不受傷害。 7.參與細胞凍存。在細胞培養中,胎牛血清加入基礎培養基的濃度大多為5%~20%(最常見為10%)的。具體到不同試驗,應依據文獻報導,或細胞類型或基礎培養基的成分來確定適宜濃度。 |
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