細胞培養從復蘇細胞開始,澳洲進口特級胎牛血清提高實驗成功率

細胞高效解凍的另一個成功秘訣,就是選擇一款優質血清澳洲進口特級胎牛血清!

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發表時間:2023-03-06 10:39

細胞培養從復蘇細胞開始。怎樣有條不紊的讓細胞從沉寂中醒來?今日就給大家匯總好多個好用小竅門,早點來get!

細胞恢復步驟:

1、將凍存的細胞從液氮罐中取出,馬上放進37°C的沙浴內進行融化,柔和搖晃,加快融化,直至小瓶中只剩下一小塊冰,時間應控制在1min中;

2、用70%酒精擦洗瓶外后轉移無菌操作原則臺灣臺中,擰開瓶蓋前,用酒精噴燈火苗對瓶塞進行清潔;

3、將預加熱新鮮的完全培養基滴進小瓶中。遲緩用移液器汲取瓶內液態至15ml離心管架中,添加適量濃度和體積的完全培養基,柔和攪拌均勻;

4、200×g上下細胞混液離心式5-10min。具體的離心式速度與延續時間因細胞種類而不同。棄掉上清,添加新鮮的完全培養基重懸細胞,并把它轉移至適度的塑造器皿和介紹的塑造環境里。

細胞解凍流程表

細胞解凍流程表

常見問題:

1、液氮溫度低,當心超低溫對人會帶來的傷害,在高效液相中存放的冷藏瓶在解凍時存有爆炸風險性,因而,取下凍存管時,要做好防護措施。

2、一般細胞集中化貯藏在液氮中,取時要快速,防止溫度差對于其他凍存細胞產生影響。

3、恢復細胞的核心技術,簡單點來說便是快融,將于37°C沙浴中迅速解凍冷藏細胞<1min。

4、解凍時,凍存管先放進無菌檢測一次性PE手套中,再放入水中融化,防止環境污染也便于實際操作。

5、用加熱完的培養液漸漸地稀釋液解凍的細胞。

6、解凍細胞后,在細胞培養皿中塑造時,應盡可能保持密度高的,以提升細胞成活率。

7、留意無菌操作原則,防止細胞產生環境污染。

細胞高效解凍的另一個成功秘訣,就是選擇一款優質血清!

特級胎牛血清

Ausbian澳洲進口特級胎牛血清在細胞培養中作用,可以**程度地幫助實驗者提高細胞實驗成功率:

1.提供對維持細胞指數生長的激素,基礎培養基中沒有或量很少的營養物,以及主要的低分子營養物。

2.提供結合蛋白,能識別維生素、脂類、金屬和其他激素等,能結合或調節它們所結合的物質活力。

3.有些情況下結合蛋白質能與有毒金屬和熱原質結合,起到解毒作用。

4.是細胞貼壁、鋪展在塑料培養基質上所需因子來源。

5.起酸堿度緩沖液作用。

6.提供蛋白酶抑制劑,使在細胞傳代時使剩余胰蛋白酶失活,保護細胞不受傷害。

7.參與細胞凍存。在細胞培養中,胎牛血清加入基礎培養基的濃度大多為5%~20%(最常見為10%)的。具體到不同試驗,應依據文獻報導,細胞類型或基礎培養基的成分來確定適宜濃度。



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