體外細胞培養過程中遇到污染時，需要根據污染的類型和程度采取相應的處理措施。以下是一些常見的污染類型及其處理方法：一、細菌污染細菌污染是體外細胞培養中最常見的污染類型之一。當發現培養液變渾濁、pH值改變或細胞生長受到抑制時，應懷疑是否存在細菌污染。處理方法：更換培養基：立即更換受污染的培養基，并使用無菌技術進行操作。使用抗生素：根據污染的細菌種類選擇適當的抗生素進行處理。但需要注意，抗生素可能...
在DNA復制過程中，RNA引物起著至關重要的作用。以下是對RNA引物在DNA復制中作用的詳細解釋：一、RNA引物的定義與來源RNA引物是一小段單鏈RNA，作為DNA復制的起始點，在細胞內自然存在的DNA復制過程中起著重要作用。在細胞內DNA復制時，RNA引物通常由引發酶（primase）以DNA模板鏈為模板合成。二、RNA引物的功能RNA引物的主要功能是提供一個起始點，使得DNA聚合酶能夠從...
DNA雜交技術和PCR（聚合酶鏈式反應）是兩種在分子生物學和遺傳學研究中常用的技術，它們之間存在顯著的區別。以下是對這兩種技術的詳細比較：一、技術原理 DNA雜交技術 基本原理：DNA雜交技術是基于DNA分子間堿基互補配對的原則，使特定的DNA片段在特定的環境下與模板鏈結合。這種結合是特異性的，即只有完全互補的DNA序列才能形成穩定的雙鏈結構。過程：通常包括DNA的變性（雙鏈解開成單鏈）、復...
TaqMan探針熒光定量PCR（Real-time Quantitative PCR）是一種高度特異性和靈敏度的分子生物學技術，其原理主要基于熒光共振能量轉移（FRET）技術和Taq DNA聚合酶的5’→3’外切核酸酶活性。以下是該技術的詳細原理：一、核心組件 特異性探針：TaqMan探針是一條單鏈寡核苷酸，其5’端標記有報告熒光基團（R），3’端標記有熒光淬滅基團（Q）。探針的結合位點在兩...
RNA酶（RNase）是一類能夠催化RNA分子降解的酶，其作用廣泛且重要，主要包括以下幾個方面：一、生物學研究中的應用 基因克隆和表達研究： 去除mRNA中的poly(A)尾，如RNase H。 去除DNA制品中的污染RNA，如RNase A。 在circRNA富集和分析中具有重要作用，如RNase R。 確定RNA或DNA中的突變： RNase A可用于從DNA:RNA雜交體中去除未...
細胞培養箱中的二氧化碳濃度對細胞生長具有重要影響。如果二氧化碳濃度過低，可能會導致以下一系列問題：一、細胞生長受阻二氧化碳是細胞生長的必需成分之一，它在維持培養液pH值穩定方面起著關鍵作用。當二氧化碳濃度過低時，培養液的pH值可能會發生變化，偏離細胞生長的最適范圍（通常pH7.2~7.4）。這種酸堿度的變化會影響細胞膜的通透性、酶的活性以及細胞代謝過程，從而導致細胞生長速度減慢甚至停止。二、...
細胞培養瓶是一種用于細胞培養的方形、寬瓶頸設計的特殊耗材，其規格和面積標準對于細胞培養實驗至關重要。以下是對細胞培養瓶規格及面積標準的詳細闡述：一、細胞培養瓶的常見規格細胞培養瓶的常見規格通常以底面積來表示，常見的規格有25cm2、75cm2、175cm2、225cm2等。這些規格滿足了實驗人員在不同實驗階段和不同細胞數量需求下的使用。二、細胞培養瓶的面積標準細胞培養瓶的面積標準是指其底面積...
細胞培養基是生命科學研究與生物技術領域中的重要工具，為細胞的生長、增殖和分化提供了必要的營養與支持。在眾多的培養基中，199培養基（Medium 199，簡稱M199）和MEM培養基（Minimum Essential Medium，最小必需培養基）因其成分和適用性，被廣泛應用于不同類型的細胞培養中。199培養基由Morgan等人于1950年設計，最初用于研究雞胚成纖維細胞的營養需求。該培養...
PCR探針設計的基本原理涉及多個方面，以下是對其的詳細闡述： 一、探針的基本構成與功能探針是一種經過特殊標記的核酸序列，能夠與特定的DNA或RNA序列雜交，用于檢測和分析PCR擴增產物。在PCR反應中，探針通常用于實時監測熒光信號的變化，從而實現對目標核酸分子的定量分析。探針通常由熒光基團和淬滅基團兩部分構成，熒光基團在受到激發光照射時會發出熒光，而淬滅基團則能夠吸收或抑制熒光基...
Real-time PCR（實時熒光定量PCR）和普通PCR（常規PCR）是兩種不同的分子生物學技術，它們在實驗操作、數據分析以及應用領域等方面存在顯著差異。以下是對這兩種技術的詳細比較：一、實驗操作上的區別Real-time PCR：在PCR反應過程中實時監測熒光信號的變化。通過特定的熒光染料或探針與PCR產物結合，實時檢測熒光信號的增強，從而反映PCR產物的擴增情況。普通PCR：在PCR...
動物細胞培養并不一定要進行傳代培養，但傳代培養在動物細胞培養過程中是一個常見的步驟，有其特定的作用和意義。首先，原代細胞是指從機體取出后立即培養的細胞，這是動物細胞培養的起點。然而，原代細胞在培養過程中會逐漸達到飽和狀態，此時細胞密度過大，有害代謝物積累，培養液中營養物質缺乏，同時貼壁生長的細胞還會出現接觸抑制現象，導致細胞分裂受阻。為了克服這些問題，傳代培養成為了一個有效的解決方案。傳代培...
在DNA復制過程中，RNA引物的主要作用是提供3'-OH末端作為合成新DNA鏈的起點。以下是對RNA引物在DNA復制中作用的詳細解釋：一、RNA引物的定義與來源定義：RNA引物是一小段單鏈RNA，作為DNA復制的起始點，在細胞內自然存在的DNA復制過程中起著重要作用。來源：在細胞內DNA復制時，RNA引物通常由引發酶（primase）以DNA模板鏈為模板合成。二、RNA引物的功能提供起始點：...
MEM培養基，全稱Minimum Essential Medium，即必需基礎培養基，是一種廣泛應用于動物細胞培養的基礎培養基。由Harry Eagle在Eagle基本培養基（BEM）的基礎上發展而來，MEM培養基以其簡單的成分和廣泛的適用性，成為細胞培養領域不可或缺的重要工具。MEM培養基的核心成分包括12種必需氨基酸、L-谷氨酰胺和8種維生素。這些成分共同為細胞的生長和增殖提供了基本的營...
在細胞培養領域，培養基作為細胞生長和增殖的基石，其成分與配比對于細胞的健康狀態、生長速率及實驗結果的可靠性至關重要。然而，僅僅依賴基礎培養基往往難以滿足復雜實驗需求，因此，培養基與其他試劑的協同使用成為了優化細胞培養環境、提升實驗效率的關鍵策略。本文將探討培養基與血清、抗生素、轉染試劑及其他添加劑的配合使用，旨在為科研人員提供一份實用的操作指南。一、血清：營養與生長因子的雙重補充血清，尤其是...
鱗翅目動物（蝴蝶和飛蛾）的翅膀顏色圖案非常多樣化，許多物種的翅膀顏色圖案都是黑白的，或者是深色和明亮的，這與黑色素的存在和缺乏有關。許多翅膀顏色圖案的變異都是自然選擇和進化的教科書范例。典型的例子包括英國胡椒蛾白樺（Biston betularia）的黑色形式的頻率迅速增加，這是由于19世紀末英國碳燃燒和工業化造成的更黑更黑的環境所導致的，還有Heliconius蝴蝶的模擬輻射，等等。盡管這...
在細胞培養實驗中，DMEM（Dulbecco's Modified Eagle's Medium）和RPMI 1640是兩種最常用的基礎培養基。盡管它們都能為細胞提供必要的營養成分，但它們的成分、用途以及適用的細胞類型卻有所不同。本文將詳細探討這兩種培養基的用途及各自適合的細胞培養類型。首先，從成分上來看，DMEM培養基是在Eagle's Medium的基礎上由Dulbecco在1959年改...
DNA雜交技術和PCR（聚合酶鏈式反應）是兩種在分子生物學和遺傳學領域中廣泛使用的技術，它們之間存在顯著的差異。以下是兩者的主要區別：一、技術原理DNA雜交技術：基于具有互補堿基序列的DNA分子之間可以通過堿基對之間形成氫鍵等，形成穩定的雙鏈區。在進行DNA分子雜交前，通常需要將DNA分子從細胞中提取出來，并通過加熱或提高pH值的方法將雙鏈DNA分子分離成單鏈。然后，將兩種生物的DNA單鏈放...
RNA聚合酶和DNA聚合酶是兩種在生物體內扮演著重要角色的酶，它們的主要區別在于以下幾個方面：一、催化反應及作用底物RNA聚合酶：催化RNA分子的合成，將DNA的信息轉錄成RNA分子。作用底物是NTP（核糖核苷三磷酸）。DNA聚合酶：催化DNA分子的合成，將DNA單鏈合成為DNA雙鏈。作用底物是dNTP（脫氧核糖核苷三磷酸）。二、催化機制及引物需求RNA聚合酶：在催化反應中不需要引物，可以直...
氣溶膠污染控制措施主要包括以下幾個方面：一、實驗室設計與布局區域劃分：實驗室應進行嚴格的區域劃分，如試劑準備區、樣本制備區、擴增及產物分析區等，各區域之間應有明確的隔離措施。實驗材料和試劑只能從低污染風險區流向高污染風險區，同時氣流也應遵循這一方向，以避免交叉污染。負壓通風系統：實驗室應配備專門的負壓通風系統，確保實驗室空氣從低風險區向高風險區單向流動。負壓通風系統可以有效防止污染空氣外泄，...
優級胎牛血清與特級胎牛血清：選擇適合的實驗伙伴在細胞培養領域，胎牛血清（Fetal Bovine Serum，FBS）作為不可或缺的補充物，扮演著至關重要的角色。根據內毒素含量、質量控制以及適用范圍的不同，胎牛血清被劃分為不同的等級，其中特級胎牛血清和優級胎牛血清是最常見的兩種類型。盡管它們都來源于胎牛的血液，但在多個方面存在顯著差異，因此選擇適合的血清對于實驗的成功至關重要。內毒素含量與安...
支原體標準品10CFU主要用于驗證檢測方法的靈敏度，特別是針對支原體的PCR或qPCR檢測方法?！稓W洲藥典》第2.6.7章規定，使用PCR或qPCR方法對支原體進行檢測時，其靈敏度需要達到10CFU/ml。因此，支原體標準品10CFU特別適用于以下幾種檢測方法：PCR檢測：包括凝膠電泳檢測和熒光定量檢測。其原理是在支原體16S rRNA基因的保守區設計引物，通過檢測支原體DNA來檢測細胞中有...
PCR完的產物是可以在-20℃條件下保存的。然而，保存時間和保存效果會受到多種因素的影響，具體如下：一、保存時間PCR產物在-20℃條件下可以保存一定的時間，但長時間保存可能會導致DNA分子發生輕微的降解，特別是對于較長的片段，可能會影響測序結果的準確性。一般來說，如果儲存條件良好，避免頻繁凍融，PCR產物在-20℃下保存一年左右是沒有問題的。但需要注意的是，兩個星期已經是一個相對較長的保存...
細胞培養基是用于支持細胞在體外生長和維持的液體培養基，其主要功能是模擬體內環境條件，為細胞提供所需的營養成分、激素和無毒的生長環境。在細胞培養基中，緩沖體系是維持培養環境穩定的關鍵部分，對于確保細胞正常生長和實驗結果的可靠性至關重要。細胞生長與pH值的關系細胞對pH值的變化非常敏感，大多數細胞適宜的pH范圍為7.0到7.4。偏離這個范圍可能會對細胞生長產生有害影響，如抑制細胞增殖、降低細胞活...
TPO和SCF培養基是一種特定的培養基配方，主要用于造血干細胞（HSCs）的體外擴增和培養。以下是對TPO和SCF培養基的詳細解釋：一、定義與組成TPO（促血小板生成素）：是一種重要的細胞因子，對造血干細胞的增殖和分化具有關鍵作用。在TPO和SCF培養基中，TPO通常以一定的濃度存在，以支持造血干細胞的生長和擴增。SCF（干細胞生長因子）：同樣是造血干細胞培養中不可或缺的細胞因子。SCF能夠...
造血干細胞的培養方式在理論上和實踐上都有其特點。以下是對造血干細胞培養方式的詳細解析：理論上的培養方式在理論層面，造血干細胞（HSCs）被認為是懸浮培養的細胞類型。這意味著在理想的培養條件下，它們不會在培養皿底部或其他固體介質上貼附生長，而是自由地懸浮在培養液中。實踐中的培養方式在實際操作中，造血干細胞的培養方式可能受到多種因素的影響，包括培養基的成分、培養條件以及細胞的初始狀態等。初始狀態...
