lamp檢測技術的工作原理介紹

生產用于反應的起始材料：

引物設計：LAMP擴增過程中使用了多個引物，包括兩對外部引物（F3和B3）以及兩對內部引物（FIP和BIP），以及一個環引物（Loop primer）。這些引物的設計是基于目標DNA或RNA的特定序列，以確保高度特異性的擴增。

循環擴增：

生產啞鈴狀結構的形成外部引物較短（21-24bp），并且在反應混合物中的濃度較低，與模板結合的速度比內部引物慢。向前和向后的內部和外部引物與BstDNA聚合酶（在60-65°C下顯示出高鏈置換活性）相結合，形成啞鈴狀DNA結構

伴隨循環的延伸和再循環：

隨后的階段涉及自引模板的指數擴增和鏈的替換，從而產生雙鏈DNA的混合物。LAMP的最終輸出是花椰菜狀結構。

與PCR不同，LAMP在單一溫度下（通常為60-65℃）進行擴增，因此不需要溫度循環。這有助于操作簡單且耗時較短。

特殊結構的引物：LAMP技術中的引物具有特殊的結構，其中FIP（Forward Inner Primer）由F1c和F2組成，BIP（Backward Inner Primer）由B1c和B2組成。這些引物的結構促使在擴增過程中產生大量的特定結構的產物，從而進一步提高擴增效率。

自我啟動的擴增過程：LAMP技術通過自我啟動的過程在目標核酸序列上進行擴增。一旦引物與目標序列的互補區域匹配，引物的結構促使產物不斷生成，形成一個DNA“蘑菇云”狀的結構。

環結構的形成：LAMP擴增的一個關鍵特征是環結構的形成。在LAMP擴增過程中，Loop引物在互補區域與目標序列結合，促使產物的循環形成。這種環結構不僅穩定了產物，還使得新的引物不斷與目標序列結合，從而實現高效擴增。

產物分析：LAMP擴增產物通常通過肉眼可見的方法進行分析，例如使用熒光染料，pH指示劑或者裸眼觀察沉淀物等。產物的積累會導致可觀察的變化，從而確定擴增是否成功。