實驗室支原體檢測方法有哪些?實驗室支原體檢測方法 二維碼
發(fā)表時間:2023-10-24 16:51 細胞實驗中支原體污染是較為麻煩的問題,困擾著很多科研人。今天跟大家分享的是實驗室支原體檢測方法。 培養(yǎng)法:使用支原體肉湯培養(yǎng)基接種待測樣品(細胞培養(yǎng)上清等),經(jīng)過約7-21天的培養(yǎng),觀察有無支原體的生長,以此來判斷細胞培養(yǎng)基中有無支原體存在。該方法雖然經(jīng)濟可靠,但實驗周期較長,所以常用來進行對懷疑細胞的最后甄別。 熒光指示細胞法:該方法較為快捷,方法簡單,但其靈敏度有一定的欠缺,易造成漏檢。 PCR法:PCR 法檢測支原體的方法最為快速、靈敏、取樣量少,既可做細胞本身,也可做細胞上清的檢測,同時可以檢測多種支原體的污染,是目前常用的檢測手段。但其成本較高,條件要求嚴格,且有時易出現(xiàn)假陽性或假陰性。彌補的方法是對懷疑的樣品要經(jīng)過3 次PCR 檢測,或用培養(yǎng)法檢測。 DNA染色法:使用DNA染色試劑(如:Hoechst 33258)對細胞進行染色,由于支原體中的核酸也可以被著色,所以,如果有支原體污染,會在細胞表面或者培養(yǎng)基中見到大小不等、不規(guī)則的熒光著色顆粒,與細胞核呈現(xiàn)的橢圓形、更大更亮熒光形成鮮明對比。 不同的實驗室可根據(jù)具體情況選擇不同的方法或幾種方法聯(lián)合使用以保證檢測的準確性和靈敏度。 德國Minerva Biolabs 公司簡稱德國MB公司,生產(chǎn)的支原體常規(guī)PCR檢測試劑盒,依據(jù)操作步驟的細微差別,分一步法和經(jīng)典法兩類。 德國MB PCR法支原體檢測試劑盒,根據(jù)操作差異分為一步法和經(jīng)典法。德國MB生產(chǎn)的支原體檢測試劑盒較全球其他廠家同類產(chǎn)品,具以下優(yōu)點: ①符合歐洲藥典要求。 ②高特異性,一次檢測即可涵蓋了所有可能感染細胞的支原體物種(涵蓋歐洲藥典規(guī)定的9種支原體),根據(jù)序列一致性,至少可以檢測到107種支原體物種。操作簡單,易于觀察(使用MB的試劑盒,下表中列出的支原體物種均為陽性,其他微生物或真核細胞均為陰性,無交叉反應(yīng))。 北京締一生物科技有限公司國內(nèi)總代Ausbian品牌,德國Minerva-Biolabs微生物污染控制系列。細胞培養(yǎng)實驗使用的Ausbian澳洲進口特級胎牛血清,新生牛血清,干細胞培養(yǎng)基,馬血清,德國MB支原體檢測/祛除試劑盒,DNA污染祛除試劑,支原體PCR/qPCR定量試盒等產(chǎn)品。歡迎訪問締一生物官網(wǎng):www.276mk.com。聯(lián)系電話:4006661688。 |
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