哪種支原體DNA檢測方法更便捷？

支原體污染細胞后，多數情況下細胞病理變化不顯著，細微變化也可由于傳代、換液而緩解，因此易被忽視。但個別嚴重者，可致細胞增殖緩慢，甚至從培養器皿脫落。

為確定有無支原體污染,常用的檢測方法有：

相差顯微境檢測

將細胞按種于事先放置于培養瓶內的蓋玻片上，24h后取出，用相差油鏡觀察，支原體呈暗色微小顆粒位于細胞表面和細胞之間。

熒光染色法

熒光染色用能與DNA特異性結合的熒光染料Hoechst 33258，可使支原體內含有的DNA著色，染色后用熒光顯微鏡觀察。

支原體用普通染色法不易著色，用姬姆薩染色很淺，革蘭染色為陰性。

電鏡檢查

用掃描電鏡方法簡便快速，也可以利用透射電鏡。

4DNA分子條文檢查或支原體培養等方法

檢出率高，但方法較為復雜。

一般工業上常用的是最后一種方法—培養檢測法。

目前支原體培養檢測的周期是28天。美國藥典、歐洲藥典認可經過驗證的核酸檢測（如實時PCR）作為傳統的支原體檢測的替代方法。

既然傳統的培養耗時較長，那有沒有一種精確又快速的檢測方法呢？

答案是肯定的。

北京締一生物科技有限公司 國內總代理的德國MB 產品

qPCR Kit   (經典法)   Venor Gem qEP

支原體熒光定量PCR又稱，qPCR法：

支原體熒光定量PCR法（qPCR）：是在常規PCR基礎上，將『針對支原體特異性保守序列的探針』做熒光標記，使PCR擴增后的產物帶有熒光，利用熒光信號的變化和配套軟件，進行DNA擴增反應的實時監測，簡稱qPCR。

優點：

①靈敏度高、特異性強。

②時間短，2-3小時出結果

③檢測結果可定量

④操作簡便

支原體qPCR檢測試劑盒特點

1.內控對照為獨立包裝，遵循歐洲藥典和日本藥典操作流程。

2.高特異性，一次檢測即可涵蓋所有常見易感染細胞的支原體物種（包括歐洲藥典規定的9種支原體）。與細菌和真核DNA無交叉反應。

3.高靈敏度，最低檢測限可達到≤10CFU/ml。

4.相應配套的支原體基因組DNA和細菌基因組DNA，便于特異性驗證。

5.有相應配套的支原體絕對定量標準品，便于最后定量檢測。