胎牛血清和培養基怎么配

胎牛血清（FBS）與培養基的配制主要涉及確定血清濃度、解凍血清、混合血清與基礎培養基以及可能的添加其他補充物等步驟。以下是一個詳細的步驟說明：

確定血清濃度：首先，根據實驗需求和細胞類型，確定所需的FBS濃度。通常，FBS在培養基中的最終濃度約為5%至10%，但具體濃度可能會因細胞類型和培養條件的不同而有所變化。

血清解凍：使用三步法解凍血清，確保血清在解凍過程中不會受到污染。注意解凍時體積會增大，因此應預留足夠的空間以防止血清溢出或容器凍裂。

準備基礎培養基：準備好所需的基礎培養基，確保其在無菌條件下。

混合血清與基礎培養基：按照所需的FBS濃度，將解凍后的血清與基礎培養基混合。例如，對于100mL的10%胎牛血清完全培養基，需要吸取10mL的胎牛血清與90mL的基礎培養基混合。混合過程中應輕柔操作，確保血清和其他成分均勻分散在培養基中。

添加其他補充物：根據細胞類型和實驗需求，可能需要添加非必要氨基酸、維生素、雙抗溶液等補充物。這些補充物的添加量應參考相關實驗室方案或文獻建議。

混勻與保存：輕柔混勻培養基，確保所有成分均勻分布。然后，將配制好的培養基存儲在4°C的冰箱中，避免陽光直射。盡量在1周內用完，以保證培養基的質量和有效性。

請注意，在整個配制過程中，應嚴格遵守無菌操作規范，以防止細胞培養的污染。同時，不同品牌和來源的胎牛血清可能存在差異，因此在實際操作中應參考產品說明書和實驗室的具體要求。