什么是內參基因

內參基因，也被稱為管家基因（house-keeping genes），是一類在生物體的各種組織和細胞中持續并穩定表達的基因。這些基因的表達水平在不同樣本間相對穩定，因此常被用作標準化樣本和校正實驗數據的參照物，以消除實驗中因上樣量、操作等因素產生的誤差，確保實驗結果的準確性。

內參基因的選擇對于實驗結果的可靠性至關重要。一個理想的內參基因應該具備以下特點：

在各種組織和細胞中表達穩定，不受生長發育階段、實驗條件或疾病狀態等因素的影響。

其表達產物是維持細胞基本生命活動所必需的，因此其表達水平通常不會因外界環境的改變而發生顯著變化。

然而，實際上并不存在在所有條件下都能穩定表達的內參基因。不同的物種、組織類型、處理條件等都可能影響內參基因的表達穩定性。因此，在選擇內參基因時，需要根據具體的實驗需求和樣本特點進行綜合考慮。

常用的內參基因包括GAPDH、β-actin、18S rRNA、28S rRNA等。然而，這些基因在某些特定條件下也可能存在表達不穩定的情況。例如，GAPDH在某些人類組織中的表達量差異可達15倍，而β-actin在哮喘氣道內的表達也不穩定。因此，在選擇內參基因時，**進行預實驗來驗證其在特定條件下的表達穩定性。

近年來，隨著科技的進步，出現了篩選穩定性好的內參基因的新方法，如使用GeNorm軟件、基因芯片數據、EST數據庫等。這些方法可以幫助研究者更準確地選擇適合其實驗體系的內參基因，從而提高實驗結果的準確性和可靠性。

總的來說，內參基因在qPCR技術中扮演著至關重要的角色。正確選擇和使用內參基因是確保實驗結果準確性的關鍵步驟之一。