質(zhì)粒作為基因克隆和表達(dá)的常用載體,其純度和質(zhì)量的高低直接影響后續(xù)實(shí)驗(yàn)的成功與否。然而,在質(zhì)粒提取過程中,一個(gè)常見的問題就是基因組DNA的污染。這種污染不僅會影響質(zhì)粒的純度和質(zhì)量,還可能對實(shí)驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生不利影響。因此,了解如何避免基因組DNA污染對于保證實(shí)驗(yàn)成功至關(guān)重要。 一、選擇適當(dāng)?shù)馁|(zhì)粒提取方法 不同的質(zhì)粒提取方法有不同的原理和操作步驟,選擇合適的提取方法對于避免基因組DNA污染至關(guān)重要。例...
急性髓系白血病(AML)是一種預(yù)后極差的血液系統(tǒng)惡性腫瘤,也是成人中最常見的白血病類型,其臨床治療一直面臨極大挑戰(zhàn)。近年來, 免疫治療進(jìn)展突飛猛進(jìn),特別是以T細(xì)胞為核心的免疫治療,在腫瘤治療中取得了令人矚目的臨床效果,但其在AML中療效不佳。 因此,急需探索新的AML免疫治療策略。自然殺傷細(xì)胞(NK)作為天然免疫系統(tǒng)的重要組成部分,具備主要組織相容性復(fù)合體(major histocompat...
質(zhì)粒提取是一個(gè)常見的分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn),對于實(shí)驗(yàn)環(huán)境有比較高的要求,要盡可能避免雜質(zhì)DNA等核酸污染。德國MB公司生產(chǎn)的PCR Clean,高效清除核酸污染。 質(zhì)粒是生物實(shí)驗(yàn)中常用的工具,尤其在基因工程和分子生物學(xué)領(lǐng)域。然而,在質(zhì)粒提取的過程中,常常會遇到基因組DNA(gDNA)混入的問題,這不僅影響了實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,還可能對后續(xù)的實(shí)驗(yàn)步驟造成干擾。本文旨在探討質(zhì)粒提取實(shí)驗(yàn)中基因組DNA混入的...
原代小膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)是一個(gè)復(fù)雜的過程,需要一系列特定的儀器和設(shè)備來確保細(xì)胞的健康生長和實(shí)驗(yàn)的成功。以下是一些在原代小膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)過程中可能需要的儀器設(shè)備:生物安全柜:用于在無菌環(huán)境下進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)、操作和處理等,以防止微生物污染。 細(xì)胞培養(yǎng)箱:用于提供恒定的溫度、濕度和氣體環(huán)境(如5% CO?),這是細(xì)胞生長所必需的。離心機(jī):用于分離細(xì)胞和培養(yǎng)基,以及洗滌細(xì)胞。顯微鏡:用于觀察細(xì)胞的生長情況、形...
原代小膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)是一個(gè)涉及多個(gè)步驟的復(fù)雜過程,以下是對其培養(yǎng)方法的詳細(xì)闡述:一、原理原代小膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)主要利用混合膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)物分層生長的特性,以及小膠質(zhì)細(xì)胞半懸浮生長的特點(diǎn),通過搖床震蕩法將皮層來源的混合膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)物最上層的小膠質(zhì)細(xì)胞震搖下來繼續(xù)培養(yǎng),以達(dá)到分離和純化小膠質(zhì)細(xì)胞的目的。二、材料與儀器材料:新生1-3天的仔鼠、含10%胎牛血清的DMEM培養(yǎng)基、D-PBS液、消化液(0.2...
在生物科學(xué)的研究領(lǐng)域中,血清作為生物體內(nèi)環(huán)境的重要組成部分,其包含的各種酶和蛋白質(zhì)為我們提供了理解生物體功能的關(guān)鍵線索。牛血清,尤其是其含有的胺氧化酶,因其獨(dú)特的生物活性和在細(xì)胞培養(yǎng)、藥物篩選等研究中的廣泛應(yīng)用,而備受科學(xué)家們的關(guān)注。本文將重點(diǎn)探討牛血清中的胺氧化酶及其在生物學(xué)研究中的重要性。牛血清是一種含有多種生物活性物質(zhì)的復(fù)雜液體,主要由血漿去除纖維蛋白原而形成。在生物學(xué)研究中,牛血清被...
胎牛血清進(jìn)口的相關(guān)規(guī)定可以歸納如下:一、進(jìn)口資質(zhì)與備案出口國資質(zhì):出口國農(nóng)業(yè)部需要頒發(fā)牛血清采集、收購的許可證(但中國對此不做要求)。輸華企業(yè)備案:輸華企業(yè)需要在中國國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫局備案,中國的收貨公司需要提出申請,并得到國家總局的許可。進(jìn)口商資質(zhì):進(jìn)口商需要具備進(jìn)出口經(jīng)營權(quán),并提供相關(guān)的報(bào)關(guān)報(bào)檢委托書。二、報(bào)關(guān)資料與證明基本資料:包括商業(yè)合同、裝箱單、商業(yè)相關(guān)證件等。檢疫證書:血清檢...
進(jìn)口胎牛血清融化三步法推薦如下:**步:室溫或較低溫水浴初步融化溫度:室溫或15-20℃(新接的自來水溫度約24℃上下)時(shí)間:100ml血清:35分鐘(室溫)或5分鐘(15-20℃水浴)500ml血清:90分鐘(室溫)或18分鐘(15-20℃水浴)1000ml血清:100分鐘(室溫)或20分鐘(15-20℃水浴)注意:此步驟的目的是使血清初步融化,降低冰塊大小,為后續(xù)步驟做準(zhǔn)備。第二步:中溫...
遺傳信息的保存不斷受到內(nèi)源性和外源性因素的挑戰(zhàn)。保護(hù)遺傳信息的重要性不言而喻。通用轉(zhuǎn)錄因子IIH (TFIIH)對轉(zhuǎn)錄和核苷酸切除DNA修復(fù)(NER)至關(guān)重要,是我們身體自身“DNA修復(fù)團(tuán)隊(duì)”之一;XPD解旋酶是TFIIH的核心組成成分,XPD的解旋酶功能是核苷酸切除DNA修復(fù)的關(guān)鍵步驟,與轉(zhuǎn)錄起始無關(guān),XPD僅作為其他因子的支架。像嗅探犬一樣,NER檢測出受損的標(biāo)記區(qū)域,追蹤受損的DNA,...
在細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)中,胎牛血清作為一種常用添加劑,在免疫細(xì)胞的培養(yǎng)過程中發(fā)揮著重要的作用。本文將詳細(xì)探討為什么培養(yǎng)免疫細(xì)胞需要胎牛血清,并參考相關(guān)數(shù)據(jù)和文獻(xiàn)進(jìn)行論證。 一、胎牛血清的特性和來源 胎牛血清5-8月齡牛胚胎。與新生牛和小牛血清相比,胎牛血清因其從未接觸過外界,所以抗體含量明顯降低,這使得它與培養(yǎng)細(xì)胞發(fā)生交叉反應(yīng)的風(fēng)險(xiǎn)也較低。 二、胎牛血清在免疫細(xì)胞培養(yǎng)中的作用 提供營養(yǎng)物質(zhì)和穩(wěn)定環(huán)境...
遺傳信息通常沿著一條單行道傳播:寫在DNA中的基因是制造RNA分子的模板,然后將其翻譯成蛋白質(zhì)。1970年,科學(xué)家發(fā)現(xiàn)一些病毒具有稱為逆轉(zhuǎn)錄酶的酶,可以將RNA轉(zhuǎn)錄成DNA。現(xiàn)在,科學(xué)家們發(fā)現(xiàn)了一個(gè)更奇怪的轉(zhuǎn)折,逆轉(zhuǎn)錄酶的細(xì)菌版本讀取RNA作為模板,以制造寫在DNA中的全新基因。然后,這些基因被轉(zhuǎn)錄回RNA,當(dāng)細(xì)菌被病毒感染時(shí),RNA被翻譯成保護(hù)性蛋白質(zhì)。相比之下,病毒逆轉(zhuǎn)錄酶不會產(chǎn)生新基因...
EP文件在醫(yī)療和實(shí)驗(yàn)室領(lǐng)域通常指的是與臨床和實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會(CLSI)相關(guān)的指導(dǎo)文件,這些文件為體外診斷(IVD)產(chǎn)品的性能驗(yàn)證提供了詳細(xì)的指導(dǎo)。關(guān)于特異性(Specificity)的文件,雖然沒有直接提到“EP文件中關(guān)于特異性的文件”的具體文件名,但可以參考CLSI發(fā)布的一系列EP文件,特別是那些涉及性能驗(yàn)證和分析特異性的文件。EP文件的通用性:EP文件通常涵蓋了體外診斷產(chǎn)品的各個(gè)方面,...
更換培養(yǎng)基:如果細(xì)胞對新配置的培養(yǎng)基不適應(yīng),可以逐...
DNA中有RNA污染在分子實(shí)驗(yàn)中是一個(gè)需要關(guān)注的問題,其對實(shí)驗(yàn)結(jié)果和后續(xù)分析可能產(chǎn)生多方面的影響。本文就為大家解答DNA中有RNA污染潛在影響: 一、實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性受影響 錯(cuò)誤的數(shù)據(jù)解讀:在RNA相關(guān)的實(shí)驗(yàn)中,如果DNA污染了RNA樣本,可能導(dǎo)致研究者錯(cuò)誤地解讀實(shí)驗(yàn)結(jié)果。例如,在基因表達(dá)分析中,DNA污染可能干擾RNA的逆轉(zhuǎn)錄和PCR擴(kuò)增過程,導(dǎo)致對基因表達(dá)水平的錯(cuò)誤估計(jì)。影響基因表達(dá)分析...
病毒學(xué)作為生物學(xué)的一個(gè)重要分支,專注于研究病毒的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、復(fù)制、感染機(jī)制以及病毒與宿主之間的相互關(guān)系。在這個(gè)復(fù)雜的領(lǐng)域中,細(xì)胞實(shí)驗(yàn)發(fā)揮著重要的作用,為病毒學(xué)的研究提供了堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)。 一、病毒的生命周期與細(xì)胞密切相關(guān) 病毒是一種非細(xì)胞生命形態(tài),其生命周期的幾乎全部階段都需要在宿主細(xì)胞內(nèi)完成。病毒通過附著、侵入、脫殼、生物合成、裝配和釋放等步驟在細(xì)胞內(nèi)進(jìn)行復(fù)制和繁殖。因此,要深入了解病毒的生物...
在病毒學(xué)研究中,細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室是進(jìn)行病毒培養(yǎng)、復(fù)制和感染機(jī)制研究的重要場所。然而,微生物污染是這一過程中常見且嚴(yán)重的問題,它不僅影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,還可能對研究人員的健康構(gòu)成威脅。因此,避免細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室發(fā)生微生物污染在病毒學(xué)研究中顯得尤為重要。 一、微生物污染對病毒學(xué)研究的影響 實(shí)驗(yàn)結(jié)果的不準(zhǔn)確性:微生物污染會干擾病毒的正常生長和復(fù)制,導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)結(jié)果出現(xiàn)偏差。例如,細(xì)菌或真菌的污染會使培養(yǎng)基變渾濁...
單細(xì)胞基因組學(xué)是一個(gè)精密的科研學(xué)科,每一個(gè)單獨(dú)的細(xì)胞都彌足珍貴,包含著多樣的遺傳信息,是打開生命科學(xué)一把鑰匙。在進(jìn)行單細(xì)胞基因組學(xué)的實(shí)驗(yàn)室中,確保實(shí)驗(yàn)環(huán)境的純凈、避免細(xì)胞污染十分重要。德國MB公司生產(chǎn)的Mycoplasma Off,高效清除實(shí)驗(yàn)環(huán)境中的支原體、細(xì)菌等微生物污染 單細(xì)胞基因組學(xué)提供了一種強(qiáng)大的方法來了解變異如何影響基因表達(dá),特別是在人類大腦中眾多細(xì)胞類型中。此外,它可能會改善我...
在單細(xì)胞基因組學(xué)的探索之旅中,我們追尋的是單個(gè)細(xì)胞內(nèi)部那細(xì)微而復(fù)雜的遺傳奧秘。每一個(gè)細(xì)胞都包含重要的遺傳信息,對于理解生命活動、疾病機(jī)制以及開發(fā)個(gè)性化治療具有重要的價(jià)值。然而,在這項(xiàng)精密的科研工作中,一個(gè)微小的污染都可能令實(shí)驗(yàn)毀于一旦。因此,避免細(xì)胞污染在單細(xì)胞基因組學(xué)實(shí)驗(yàn)中顯得尤為重要。 一、確保實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)確性 單細(xì)胞基因組學(xué)實(shí)驗(yàn)的目標(biāo)在于深入解析單個(gè)細(xì)胞的基因表達(dá)和遺傳變異。細(xì)胞污染可能導(dǎo)致...
健康人體細(xì)胞的 DNA共有 23對染色體。額外的染色體通常會導(dǎo)致有害的基因失衡。對于生物體來說,額外的染色體通常是一個(gè)問題,可能會破壞發(fā)育或?qū)е录膊 5行┘?xì)胞反而受益——例如,癌細(xì)胞或致病酵母菌可以利用額外的染色體逃避治療,并產(chǎn)生抗藥性。來自柏林夏里特大學(xué)的一組研究人員現(xiàn)在已經(jīng)破譯了酵母是如何設(shè)法彌補(bǔ)這種基因失衡的。他們的研究結(jié)果發(fā)表在Nature雜志上,這可能會為治療耐藥腫瘤或真菌感染提...
細(xì)胞在去除支原體后,仍然有可能再次被污染。支原體污染是細(xì)胞傳代及培養(yǎng)中的常見問題,由于支原體通常依靠與細(xì)胞競爭培養(yǎng)基中的養(yǎng)分存活,因此即使細(xì)胞已經(jīng)去除了支原體,如果培養(yǎng)環(huán)境或操作過程中再次引入支原體,細(xì)胞仍然有可能再次被污染。為了防止細(xì)胞再次被支原體污染,可以采取以下措施:確保細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境干凈、無菌,包括培養(yǎng)基、培養(yǎng)瓶、吸管等。定期進(jìn)行支原體檢測,一旦發(fā)現(xiàn)支原體污染,及時(shí)采取措施處理。在細(xì)胞...
,甚至導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)失敗。因...
隨著生物技術(shù)的快速發(fā)展,CRISPR(Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats)技術(shù)已成為現(xiàn)代基因編輯領(lǐng)域中的一項(xiàng)創(chuàng)新技術(shù)。然而,盡管CRISPR技術(shù)具有高度的特異性和效率,但在實(shí)驗(yàn)過程中可能遭遇的DNA和核酸酶污染問題,卻可能對其結(jié)果產(chǎn)生深遠(yuǎn)的影響。本文將對這兩種污染及其對CRISPR實(shí)驗(yàn)的影響進(jìn)行深入的探討。 一、...
熒光信號指數(shù)擴(kuò)增階段是指在實(shí)時(shí)定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(qPCR)過程中,熒光信號呈指數(shù)增長的一個(gè)階段。在這個(gè)階段,每個(gè)循環(huán)積聚的產(chǎn)物準(zhǔn)確加倍(假定100%反應(yīng)效率),PCR產(chǎn)物量的對數(shù)值與起始模板量之間存在線性關(guān)系。這是因?yàn)樵谶@個(gè)階段,所有試劑均充足,反應(yīng)的動力學(xué)推動反應(yīng)有利于擴(kuò)增子加倍,所以產(chǎn)物出現(xiàn)指數(shù)級擴(kuò)增。在這個(gè)階段進(jìn)行定量分析最為合適,因?yàn)镃q值與初始模板量的對數(shù)之間存在線性關(guān)系。德國M...
核酸分子雜交技術(shù)定量的原理主要基于堿基互補(bǔ)配對原則。在適宜的條件下,如特定的溫度及離子強(qiáng)度等,具有同源性的兩條核酸單鏈(通常是待測核酸和探針)能夠按照堿基互補(bǔ)原則形成穩(wěn)定的雙鏈結(jié)構(gòu),即雜交體。這種雜交過程是高度特異的,可以用于定性或定量檢測特定的RNA或DNA序列片段。具體來說,核酸分子雜交技術(shù)定量通常涉及以下幾個(gè)步驟:探針的設(shè)計(jì)與標(biāo)記:根據(jù)目標(biāo)核酸序列設(shè)計(jì)探針,并通過放射性核素、熒光物質(zhì)或...
腫瘤細(xì)胞培養(yǎng)是一種常用的實(shí)驗(yàn)技術(shù),在癌癥研究、藥物篩選和生物醫(yī)學(xué)研究中具有重要作用。然而,細(xì)菌污染是細(xì)胞培養(yǎng)過程中常見且嚴(yán)重的問題。細(xì)菌污染不僅會影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,還會導(dǎo)致細(xì)胞培養(yǎng)失敗,浪費(fèi)資源和時(shí)間。因此,了解細(xì)菌污染的來源及其影響,對制定有效的防控措施具有重要意義。 細(xì)菌污染的來源環(huán)境污染:實(shí)驗(yàn)室空氣中的塵埃、實(shí)驗(yàn)臺面的殘留物、培養(yǎng)箱和顯微鏡等設(shè)備如果沒有定期清潔和消毒,都可能成為細(xì)...