在分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中,核酸污染是一個(gè)常見(jiàn)且令人頭痛的問(wèn)題。核酸污染可能會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生嚴(yán)重影響,導(dǎo)致數(shù)據(jù)的不準(zhǔn)確甚至錯(cuò)誤的結(jié)論。理解核酸污染的來(lái)源及其影響對(duì)于保證實(shí)驗(yàn)的可靠性十分重要。 核酸污染的來(lái)源環(huán)境污染:實(shí)驗(yàn)室環(huán)境中的空氣、臺(tái)面、設(shè)備和實(shí)驗(yàn)材料都可能成為核酸污染的來(lái)源。空氣中的塵埃顆粒、實(shí)驗(yàn)臺(tái)上的殘留物以及未清潔干凈的儀器都可能攜帶核酸分子。 實(shí)驗(yàn)人員:實(shí)驗(yàn)人員自身是核酸污染的重要來(lái)源。...
在活細(xì)胞中對(duì)生物大分子,如蛋白質(zhì)和RNA等進(jìn)行時(shí)空定位和追蹤,對(duì)于理解它們的生物學(xué)功能和揭示其機(jī)制至關(guān)重要。綠色熒光蛋白的發(fā)現(xiàn)和開(kāi)發(fā)顯著提高了活細(xì)胞內(nèi)功能性蛋白成像的適用性。目前,熒光點(diǎn)亮RNA適配體 (FLAP) 已作為熒光蛋白的對(duì)應(yīng)物應(yīng)用于細(xì)胞中功能RNA的成像。FLAP通常是利用體外進(jìn)化篩選技術(shù)得到的一段RNA序列,其結(jié)合配體后能顯著增強(qiáng)配體的熒光。由于其高亮度、更好的可編程性和較小的...
CRISPR(Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats)技術(shù),作為近年來(lái)生物學(xué)領(lǐng)域的革命性技術(shù),為基因編輯提供了前所未有的精確性和便利性。然而,CRISPR技術(shù)的應(yīng)用離不開(kāi)細(xì)胞培養(yǎng)這一基本實(shí)驗(yàn)技術(shù)。本文旨在探討在CRISPR相關(guān)實(shí)驗(yàn)中,細(xì)胞培養(yǎng)的作用及意義。 一、細(xì)胞培養(yǎng)在CRISPR實(shí)驗(yàn)中的作用 提供實(shí)驗(yàn)材料細(xì)胞培養(yǎng)...
基因拷貝數(shù)的測(cè)定,涉及到大量分子實(shí)驗(yàn)。在分子實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,需要對(duì)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行嚴(yán)格的核酸污染控制。使用德國(guó)MB公司生產(chǎn)的PCR Clean,可以高效清除實(shí)驗(yàn)室中核酸污染。在生物學(xué)的廣闊領(lǐng)域中,基因拷貝數(shù)(Gene Copy Number,簡(jiǎn)稱GC)是一個(gè)重要的生物參數(shù)。它代表了某一特定基因或DNA序列在單倍體基因組中出現(xiàn)的數(shù)量,為我們理解基因的表達(dá)、功能以及生物的遺傳特性提供了重要的線索。本文將探...
動(dòng)物細(xì)胞的原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)是動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中的不同階段,兩者之間存在密切的關(guān)系。原代培養(yǎng)是指從動(dòng)物體內(nèi)獲取的細(xì)胞、組織或器官,經(jīng)過(guò)體外培養(yǎng)后,直到**次傳代為止。這個(gè)過(guò)程首先用無(wú)菌操作的方法從動(dòng)物體內(nèi)取出所需的組織(或器官),經(jīng)消化,分散成單個(gè)游離的細(xì)胞,在人工培養(yǎng)下,使其不斷地生長(zhǎng)及繁殖。在體外培養(yǎng)的過(guò)程中尚未發(fā)生細(xì)胞分裂、增殖的細(xì)胞即為原代培養(yǎng)細(xì)胞。傳代培養(yǎng)則是指將原代培養(yǎng)的細(xì)胞繼續(xù)...
胚胎干細(xì)胞(Embryonic Stem Cells, ESC)因其獨(dú)特的分化潛能和再生醫(yī)學(xué)的廣闊前景而備受關(guān)注。那如何提高胚胎干細(xì)胞ESC培養(yǎng)成功率呢? 優(yōu)化培養(yǎng)基配方:通過(guò)調(diào)整培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)因子、激素和微量元素等成分,可以優(yōu)化ESC的生長(zhǎng)環(huán)境,提高細(xì)胞的活性和穩(wěn)定性。采用先進(jìn)的細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù):如使用三維培養(yǎng)系統(tǒng)、微流控芯片等先進(jìn)技術(shù),可以模擬體內(nèi)的生長(zhǎng)環(huán)境,為ESC提供更好的生長(zhǎng)條件。建立...
支原體感染可能導(dǎo)致生物制品的質(zhì)量下降,包括蛋白質(zhì)表達(dá)的異常、細(xì)胞壽命的減少、細(xì)胞凋亡的增加等。對(duì)于藥品和生物制品的生產(chǎn),支原體的存在可能會(huì)影響產(chǎn)品的安全性、穩(wěn)定性和治療效果。因此,支原體檢測(cè)是確保產(chǎn)品質(zhì)量和安全性的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。 豬鼻支原體被稱為全球哺乳動(dòng)物細(xì)胞和組織培養(yǎng)物中普遍的污染物之一,大約占細(xì)胞培養(yǎng)中支原體污染的20-50%。豬鼻支原體(Mycoplasma hyorhinis)是豬的一...
中國(guó)普通微生物菌種保藏管理中心(China General Microbiological Culture Collection Center,簡(jiǎn)稱CGMCC)成立于1979年,是一個(gè)以提供專業(yè)技術(shù)服務(wù)為主的公益性機(jī)構(gòu),設(shè)立在中國(guó)科學(xué)院微生物研究所。該中心于1995年獲得布達(dá)佩斯條約國(guó)際保藏中心的資格,是我國(guó)提供一般菌種資源服務(wù)和專利生物材料保存的很大規(guī)模的保藏中心。 CGMCC致力于微生物...
研究人員通常通過(guò)化學(xué)方式附著“熒光基團(tuán)”來(lái)研究蛋白質(zhì)或氨基酸等生物分子,當(dāng)被激發(fā)后,在高倍顯微鏡成像下,這些熒光基團(tuán)或標(biāo)簽會(huì)呈現(xiàn)彩虹般的顏色,可以示蹤、可以幫助檢測(cè)疾病或識(shí)別遺傳條件,為研究人員提供了豐富的信息。一次要檢測(cè)一種以上的分子——多重檢測(cè),需要使用發(fā)出不同顏色光的其他類(lèi)型的熒光基團(tuán)。但是在單分子水平上區(qū)分不同的顏色是非常困難的。這就是為什么大多數(shù)顯微鏡只能看到三到四種顏色。雖然可以...
細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室是進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)、研究和實(shí)驗(yàn)的重要場(chǎng)所,其環(huán)境的潔凈度對(duì)于實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性有很大的影響。定期對(duì)細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行清潔,可以有效防止微生物污染,從而提高實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性。如何進(jìn)行細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室的清潔工作?有哪些容易被遺忘的衛(wèi)生死角。 日常清潔 表面清潔:每天試驗(yàn)前后,用消毒液(如75%乙醇)擦拭實(shí)驗(yàn)臺(tái)、設(shè)備表面和其他常接觸的區(qū)域。地面清潔:每日使用無(wú)菌拖把和適當(dāng)?shù)南緞┣鍧嵉孛?..
細(xì)胞培養(yǎng)是生物學(xué)和醫(yī)學(xué)研究中不可或缺的一部分。選擇合適的培養(yǎng)基是確保細(xì)胞正常生長(zhǎng)、分化和功能發(fā)揮的關(guān)鍵因素。然而,在某些實(shí)驗(yàn)或研究需求下,使用與原有培養(yǎng)基不同的培養(yǎng)基可能是不可避免的。本文將探討在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中使用不同培養(yǎng)基的原因、影響及其可能帶來(lái)的后果。 一、使用不同培養(yǎng)基的原因 實(shí)驗(yàn)需求 特定實(shí)驗(yàn)要求:有時(shí)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)需要特定的培養(yǎng)基成分以誘導(dǎo)某些細(xì)胞行為或反應(yīng)。例如,研究細(xì)胞分化過(guò)程中,科...
一、引言 在生物醫(yī)學(xué)和生物技術(shù)領(lǐng)域中,動(dòng)態(tài)濁度法(Kinetic Turbidimetric Method)是一種重要的檢測(cè)手段,它通過(guò)監(jiān)測(cè)溶液濁度的變化來(lái)反映溶液中特定成分或反應(yīng)的狀態(tài)。本文將詳細(xì)介紹動(dòng)態(tài)濁度法的技術(shù)原理、應(yīng)用場(chǎng)景,并探討其在胎牛血清內(nèi)毒素檢測(cè)中的應(yīng)用及其重要性。 二、動(dòng)態(tài)濁度法(Kinetic Turbidimetric Method)概述 動(dòng)態(tài)濁度法是一種基于濁度變化的...
“黑膠蟲(chóng)”污染細(xì)胞的表現(xiàn)主要包括以下幾個(gè)方面:培養(yǎng)液通常不會(huì)顯得渾濁,但在顯微鏡下觀察時(shí),可以清晰地看到細(xì)胞周?chē)团囵B(yǎng)液中存在很多“小黑點(diǎn)”。這些“小黑點(diǎn)”的數(shù)量會(huì)隨著培養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng)而逐漸增多,且無(wú)法通過(guò)更換培養(yǎng)液或洗滌細(xì)胞來(lái)去除。受“黑膠蟲(chóng)”污染的細(xì)胞,其營(yíng)養(yǎng)消耗速度會(huì)加快,因此需要更頻繁地更換培養(yǎng)液。細(xì)胞的生長(zhǎng)速度會(huì)明顯減慢,細(xì)胞狀態(tài)也會(huì)變差,出現(xiàn)空泡化嚴(yán)重的現(xiàn)象。在某些情況下,還可能導(dǎo)...
為了解決上述問(wèn)題,作者提出了DeepCRBP來(lái)識(shí)別circRNA- rbp的結(jié)合位點(diǎn),并且在circRNA數(shù)據(jù)集上的實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,DeepCRBP明顯優(yōu)于目前的方法,并且具有更好的魯棒性和泛化性。
上皮細(xì)胞是抵御病原體入侵的主要防線。然而,細(xì)菌病原體具有破壞這一屏障并促進(jìn)細(xì)菌遷移的能力。然而,結(jié)核分枝桿菌(M.tb)在這一過(guò)程中所采用的具體分子機(jī)制尚不完全清楚。 在吸入氣溶膠顆粒后,細(xì)菌往往在肺部形成持續(xù)感染,導(dǎo)致特征性肺結(jié)核綜合征的發(fā)展。此外,結(jié)核分枝桿菌可以突破肺泡屏障,從而引發(fā)肺外結(jié)核。結(jié)核分枝桿菌的發(fā)病機(jī)制嚴(yán)重依賴于全身傳播,盡管其確切的潛在機(jī)制尚未完全闡明。 肺泡上皮屏障由緊...
GRKs是絲氨酸/蘇氨酸導(dǎo)向的蛋白激酶,來(lái)自三個(gè)家族的七個(gè)成員。有幾篇論文報(bào)道了GRK4在乳腺癌發(fā)病機(jī)制中的作用。為了探討G蛋白偶聯(lián)受體激酶4 (GRK4)對(duì)HepG2細(xì)胞的生物學(xué)作用及其可能的生物學(xué)機(jī)制。科研人員用過(guò)表達(dá)grk4的慢病毒載體(OE)和陰性對(duì)照慢病毒載體(NC)感染HepG2細(xì)胞,用流式細(xì)胞術(shù)(FCM)評(píng)估細(xì)胞增殖、周期和凋亡。利用定量蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)分析比較OE細(xì)胞和NC細(xì)胞...
2024年5月10日,中國(guó)科學(xué)院微生物研究所周旭宇研究團(tuán)隊(duì)與上海市**人民醫(yī)院臨床研究院張巖教授合作,在Cell Reports在線發(fā)表題為“The histone lysine methyltransferase MLL1 regulates the activation and functional specialization of regulatory T cells”的研究論文。該...
視頻講解細(xì)胞實(shí)驗(yàn)之細(xì)胞大面積漂浮的原因和解決方法
使用PCR(聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng))檢測(cè)支原體的基本步驟如下:準(zhǔn)備樣本:支原體PCR檢測(cè)的樣本通常為患者的呼吸道分泌物、尿液、生殖道分泌物等。收集樣本時(shí),需注意避免污染,保證樣本的純凈度和完整性。提取DNA:支原體是一種細(xì)菌,其遺傳物質(zhì)為DNA。因此,在進(jìn)行PCR檢測(cè)前,需要從樣本中提取支原體的DNA。DNA提取的關(guān)鍵在于保證提取的DNA完整,避免污染和降解。進(jìn)行PCR反應(yīng):PCR反應(yīng)是在特定的溫度...
在微生物學(xué)和醫(yī)學(xué)診斷領(lǐng)域,支原體檢測(cè)是一個(gè)至關(guān)重要的環(huán)節(jié)。支原體是一類(lèi)無(wú)細(xì)胞壁、能獨(dú)立生活的最小原核細(xì)胞型微生物,其感染往往導(dǎo)致多種疾病,包括呼吸道感染、泌尿生殖道感染等。為了確保支原體檢測(cè)的準(zhǔn)確性和可靠性,標(biāo)準(zhǔn)品的選擇至關(guān)重要,而傳代水平低的菌株往往成為優(yōu)質(zhì)選擇。 一、傳代水平對(duì)菌株特性的影響 傳代是指將微生物從一個(gè)培養(yǎng)基轉(zhuǎn)移到另一個(gè)培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)的過(guò)程。在傳代過(guò)程中,微生物會(huì)受到各種因素...
支原體,作為一類(lèi)獨(dú)特的微生物,以其無(wú)細(xì)胞壁、能在無(wú)細(xì)胞的培養(yǎng)基中獨(dú)立生存和自我復(fù)制的特性而著稱。然而,豬鼻支原體(Mycoplasma hyorhinis,簡(jiǎn)稱Mhr)作為支原體家族中的一員,卻在標(biāo)準(zhǔn)支原體培養(yǎng)基中面臨著生長(zhǎng)繁殖的難題。本文旨在探討Mhr在標(biāo)準(zhǔn)支原體培養(yǎng)基中無(wú)法生長(zhǎng)繁殖的原因,并嘗試提出可能的解決方案。 一、豬鼻支原體的特性 豬鼻支原體是一種直徑約為μm的微小微生物,具有高度...
在分子生物學(xué)領(lǐng)域,聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)是一種強(qiáng)大的技術(shù),用于擴(kuò)增特定的DNA序列。傳統(tǒng)的PCR方法通常需要DNA模板,這意味著在開(kāi)始PCR反應(yīng)之前,必須先從樣本中提取DNA。然而,一個(gè)常見(jiàn)的疑問(wèn)是:細(xì)胞是否可以不經(jīng)過(guò)裂解直接用于PCR實(shí)驗(yàn)?本文旨在探討這一話題,并闡述直接以細(xì)胞為模板進(jìn)行PCR實(shí)驗(yàn)可能帶來(lái)的不利影響。 一、PCR實(shí)驗(yàn)的基本原理 PCR技術(shù)基于DNA的熱穩(wěn)定性和特定DNA聚...
在分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室中,各種儀器如PCR儀、電泳儀、移液器等在日常使用中不可避免地會(huì)接觸到DNA樣本。這些儀器上的殘留DNA不僅可能干擾后續(xù)實(shí)驗(yàn)的結(jié)果,還可能成為實(shí)驗(yàn)室污染的來(lái)源。因此,祛除儀器上殘留的雜質(zhì)DNA是確保實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)確性和可靠性的重要環(huán)節(jié)。本文將探討祛除分子生物學(xué)儀器上殘留DNA的策略及其重要性。 一、祛除殘留DNA的重要性 防止實(shí)驗(yàn)交叉污染:實(shí)驗(yàn)室中不同項(xiàng)目或不同批次實(shí)驗(yàn)之間可能存在...
在細(xì)胞培養(yǎng)領(lǐng)域,胎牛血清一直是最常用的培養(yǎng)基添加劑之一。而在各種胎牛血清中,澳洲胎牛血清因其獨(dú)特的品質(zhì)和優(yōu)勢(shì)而備受青睞。本文將探討澳洲胎牛血清相對(duì)于其他胎牛血清的優(yōu)勢(shì)所在。 1.豐富的資源澳洲是一個(gè)擁有豐富自然資源的國(guó)家,其胎牛血清受益于良好的養(yǎng)殖條件和質(zhì)量管理。澳洲的廣闊草原提供了優(yōu)質(zhì)的牧草,使澳洲牛群保持健康,并且在培育高質(zhì)量胎牛血清方面起到了重要作用。 2.嚴(yán)格的監(jiān)管和質(zhì)量控制澳洲對(duì)于...
自然界中普遍存在著多樣的生物分子開(kāi)關(guān),對(duì)各種生物通路進(jìn)行著關(guān)鍵的調(diào)控。例如蛋白質(zhì)磷酸化和去磷酸化分子開(kāi)關(guān)是最普遍和重要的分子調(diào)控開(kāi)關(guān)之一。激酶和磷酸酶對(duì)多種蛋白底物的修飾是調(diào)節(jié)開(kāi)關(guān)的關(guān)鍵,能夠介導(dǎo)分子通路發(fā)生上調(diào)或下調(diào)。這些蘊(yùn)含陰陽(yáng)之道的分子開(kāi)關(guān)調(diào)控機(jī)制啟發(fā)了MADlab成員設(shè)計(jì)核酸納米結(jié)構(gòu)的分子開(kāi)關(guān)。在過(guò)去幾十年的發(fā)展中,核酸分子作為遺傳物質(zhì)被研究的同時(shí),也作為一種分子材料用于構(gòu)建納米到微...