基因槍法(也稱為微粒轟擊技術(shù)或生物彈道技術(shù))作為一種高效的基因轉(zhuǎn)移手段,在生物學(xué)和醫(yī)學(xué)研究中扮演著重要角色。然而,實(shí)驗(yàn)過程中常常面臨轉(zhuǎn)染效率不高的問題,這直接影響了后續(xù)實(shí)驗(yàn)的順利進(jìn)行和結(jié)果的可靠性。本文將從多個(gè)方面探討如何提高基因槍法細(xì)胞轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)的效率。1. 優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件選擇合適的細(xì)胞類型和狀態(tài):不同的細(xì)胞類型對基因槍法的敏感性和耐受性存在差異。因此,在選擇實(shí)驗(yàn)細(xì)胞時(shí),應(yīng)優(yōu)先考慮那些對基因槍...
在生物制品的研發(fā)、生產(chǎn)和質(zhì)量控制過程中,支原體污染檢測是一個(gè)至關(guān)重要的環(huán)節(jié)。支原體(Mycoplasma)作為一類無細(xì)胞壁的原核細(xì)胞微生物,其存在可能對生物制品的質(zhì)量和安全性產(chǎn)生嚴(yán)重影響。 支原體污染檢測的重要性支原體污染是生物制藥行業(yè)無法回避的問題。它們以寄生和共生方式存活,能夠感染細(xì)胞培養(yǎng)物,導(dǎo)致細(xì)胞生長受阻、功能改變,甚至引發(fā)細(xì)胞大量脫落和培養(yǎng)液渾濁。在生物制品的生產(chǎn)過程中,支原體污染...
干細(xì)胞體外培養(yǎng)技術(shù)是一種在實(shí)驗(yàn)室環(huán)境中,模擬體內(nèi)條件對干細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)和擴(kuò)增的技術(shù)。這項(xiàng)技術(shù)為科學(xué)家們提供了研究和應(yīng)用干細(xì)胞的重要平臺,對于再生醫(yī)學(xué)、組織工程以及疾病治療等領(lǐng)域具有重要意義。以下是對干細(xì)胞體外培養(yǎng)技術(shù)的詳細(xì)解釋:定義與基本原理干細(xì)胞體外培養(yǎng)技術(shù)是指將干細(xì)胞從生物體內(nèi)取出后,在無菌、適宜的溫度、pH值以及氣體環(huán)境等條件下,通過添加特定的生長因子、細(xì)胞因子、營養(yǎng)物質(zhì)等組成的培養(yǎng)基,...
在比較碳吸附胎牛血清和普通血清哪個(gè)更適合做抗體時(shí),我們需要考慮兩者的特性及其對抗體研究的具體影響。碳吸附胎牛血清的特點(diǎn)成分去除:碳吸附胎牛血清經(jīng)過特殊處理,能夠去除血清中的部分激素、細(xì)胞因子等親脂類物質(zhì)。這種去除作用有助于減少這些成分對抗體研究的潛在干擾。適用場景:由于其去除了部分背景成分,碳吸附胎牛血清特別適用于需要高純度和低背景干擾的抗體研究。例如,在體外培養(yǎng)研究中驗(yàn)證激素或其他因子的作...
在生物學(xué)、醫(yī)學(xué)及生物技術(shù)領(lǐng)域,細(xì)胞計(jì)數(shù)是一項(xiàng)基礎(chǔ)而至關(guān)重要的實(shí)驗(yàn)技術(shù)。它不僅用于評估細(xì)胞生長狀況、監(jiān)測細(xì)胞培養(yǎng)條件的效果,還是藥物篩選、疾病診斷及預(yù)后評估中不可或缺的一環(huán)。本文將探討細(xì)胞計(jì)數(shù)的常用方法、應(yīng)用領(lǐng)域以及其在科學(xué)研究與臨床實(shí)踐中的重要性。一、細(xì)胞計(jì)數(shù)的常用方法1. 直接計(jì)數(shù)法o 顯微鏡計(jì)數(shù):使用血球計(jì)數(shù)板(也稱為血細(xì)胞計(jì)數(shù)板或馬爾科夫計(jì)數(shù)板)是最直接且經(jīng)典的細(xì)胞計(jì)數(shù)方法之一。將細(xì)胞...
在細(xì)胞生物學(xué)領(lǐng)域,細(xì)胞的生長方式多種多樣,其中最為顯著且常見的兩種模式是細(xì)胞成團(tuán)生長(也稱為克隆生長或聚集生長)和細(xì)胞貼壁平面生長。這兩種生長模式不僅反映了細(xì)胞間相互作用的復(fù)雜性,還深刻影響著細(xì)胞的功能、分化以及組織的形成。本文旨在探討這兩種生長模式的成因、特點(diǎn)及其對生物學(xué)過程的意義。一、細(xì)胞成團(tuán)生長的奧秘1. 成因解析細(xì)胞成團(tuán)生長通常發(fā)生在懸浮培養(yǎng)條件下,即細(xì)胞不依賴于固體基質(zhì)表面生長,而...
植物細(xì)胞培養(yǎng)的原理確實(shí)與細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)緊密相關(guān),但更準(zhǔn)確地說,植物細(xì)胞培養(yǎng)的原理是基于植物細(xì)胞的全能性和細(xì)胞增殖(特別是細(xì)胞的有絲分裂)能力。植物細(xì)胞培養(yǎng)的原理細(xì)胞全能性:植物細(xì)胞具有全能性,即一個(gè)植物細(xì)胞具有發(fā)育成完整植株的潛能。這是植物細(xì)胞培養(yǎng)能夠成功的基礎(chǔ)。細(xì)胞增殖:細(xì)胞增殖是指細(xì)胞在周期調(diào)控的因子下,通過DNA復(fù)制等反應(yīng),完成細(xì)胞分裂的過程。在植物細(xì)胞培養(yǎng)中,細(xì)胞增殖是獲得大量細(xì)胞群體...
H9 Human Embryonic Stem Cells(簡稱H9 ESCs)是一類源自早期胚胎(原腸胚期之前)或原始性腺的細(xì)胞。這些細(xì)胞具有體外培養(yǎng)無限增殖、自我更新和多向分化的特性,意味著它們能夠在體外被誘導(dǎo)分化為幾乎機(jī)體所有的細(xì)胞類型。H9 ESCs于1998年由美國干細(xì)胞學(xué)家詹姆斯·湯姆森博士建立,取自早期胚胎內(nèi)細(xì)胞團(tuán),是干細(xì)胞研究領(lǐng)域中的重要模型。基礎(chǔ)研究中的應(yīng)用H9 ESCs在...
對于貼壁細(xì)胞,如果細(xì)胞形態(tài)不好,(或者細(xì)胞形態(tài)不清晰,表面似有異物等)可以在傳代的時(shí)候進(jìn)行如下操作:倒掉舊的培養(yǎng)基,加入3mIPBS洗滌一次用滴管吸走,然后再加入3ml的 PBS進(jìn)行預(yù)吹打,控制吹打力度,輕輕地大概沿著瓶底過一遍,然后吸走。這時(shí)候再開始正式的消化、吹打。其次,把吹打下來的細(xì)胞懸液加入到新的培養(yǎng)瓶內(nèi),培養(yǎng)瓶事先加入培養(yǎng)基,放入培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng),按時(shí)間點(diǎn)觀察細(xì)胞貼壁情況。10分鐘觀察...
一無菌原則:(1)操作臺環(huán)境無菌:在實(shí)驗(yàn)操作前,必須對操作臺進(jìn)行紫外線消毒至少30分鐘,然后用75%酒精擦拭,確保操作臺表面無菌。(2)實(shí)驗(yàn)材料無菌:對實(shí)驗(yàn)所需材料進(jìn)行無菌處理,包括紫外線照射、酒精擦拭、使用酒精燈進(jìn)行消毒,以及使用封口膜保持材料的無菌狀態(tài)。(3)實(shí)驗(yàn)時(shí)手部無菌:進(jìn)行實(shí)驗(yàn)操作前,必須對雙手進(jìn)行消毒,確保雙手無菌狀態(tài),避免細(xì)菌感染。(4) 實(shí)驗(yàn)操作無菌:在實(shí)驗(yàn)操作過程中,必須保...
造血干細(xì)胞 (HSC) 通常從骨髓 (BM) 動員到血液循環(huán)以進(jìn)行臨床移植。然而,單個(gè)干細(xì)胞離開骨髓的確切機(jī)制尚不清楚。 近日發(fā)表在《Science》上,標(biāo)題為:“Regulation of the hematopoietic stem cell pool by c-Kit-associated trogocytosis”的文章,揭示了其中的奧秘。 這項(xiàng)研究確定了可動員的造血干細(xì)胞庫的細(xì)胞外...
過敏,這一看似平常卻又復(fù)雜的生理反應(yīng),實(shí)際上是機(jī)體免疫系統(tǒng)對某種無害物質(zhì)產(chǎn)生的異常應(yīng)答。正常情況下,免疫系統(tǒng)是身體的重要防線,負(fù)責(zé)識別和抵御細(xì)菌、病毒等有害物質(zhì)的入侵,保護(hù)我們免受疾病的侵?jǐn)_。然而,在過敏反應(yīng)中,免疫系統(tǒng)卻會錯(cuò)誤地將一些無害的物質(zhì)(如花粉、食物、藥物等)視為威脅,從而引發(fā)一系列不必要的免疫反應(yīng)。免疫系統(tǒng)的誤判當(dāng)機(jī)體初次接觸到過敏原時(shí),免疫系統(tǒng)會將其視為外來入侵者,并啟動一系列...
胎牛血清的顏色可能呈現(xiàn)多種形式,這主要取決于其成分、處理方法和儲存條件。一般來說,胎牛血清的顏色可以是金黃色、紅色、琥珀棕色或者是介于這三者之間的顏色。以下是對胎牛血清顏色及其可能原因的詳細(xì)分析:一、顏色種類淺黃色至淡黃色:這是胎牛血清較為常見的顏色,通常表示血清質(zhì)量較好,溶血現(xiàn)象較少。澳洲和新西蘭來源的胎牛血清多為此類顏色,這可能與當(dāng)?shù)貙I(yè)的血清原料采集和加工流程有關(guān)。微紅色:一些高質(zhì)量的...
造血干細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)是一個(gè)復(fù)雜而精細(xì)的過程,主要涉及干細(xì)胞的分離、純化和培養(yǎng)等步驟。以下是根據(jù)參考文章整理出的造血干細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)的一般步驟:一、造血干細(xì)胞的分離造血干細(xì)胞的分離方法多樣,以下是幾種常見的方法:小鼠骨髓采集與單個(gè)核細(xì)胞懸液的制備HES沉淀法:抽取小鼠骨髓液,加入HES進(jìn)行沉淀,通過離心和洗滌得到細(xì)胞沉淀物。Percoll液密度梯度離心法:在骨髓液中加入淋巴細(xì)胞分離液,通過密度梯度...
在分子生物學(xué)和細(xì)胞生物學(xué)研究中,細(xì)胞轉(zhuǎn)染是一項(xiàng)至關(guān)重要的技術(shù),它允許研究人員將外源DNA、RNA或其他分子導(dǎo)入細(xì)胞內(nèi),以研究基因功能、調(diào)控機(jī)制或進(jìn)行基因治療等。其中,電穿孔和顯微注射作為兩種直接遞送目標(biāo)分子的物理方法,因其高效性和準(zhǔn)確性而備受青睞。然而,這些實(shí)驗(yàn)的成功不僅依賴于轉(zhuǎn)染技術(shù)的精確操作,還離不開高品質(zhì)胎牛血清的支持。 電穿孔法細(xì)胞轉(zhuǎn)染電穿孔法是一種利用短暫電脈沖在細(xì)胞膜上形成微小孔...
細(xì)胞轉(zhuǎn)染技術(shù)是現(xiàn)代分子生物學(xué)研究中的一項(xiàng)重要工具,廣泛應(yīng)用于基因表達(dá)、基因治療、功能基因組學(xué)等領(lǐng)域。然而,細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率往往受到多種因素的影響,這些因素直接決定了實(shí)驗(yàn)的成功與否以及后續(xù)研究的進(jìn)展。本文將從細(xì)胞本身、轉(zhuǎn)染載體、實(shí)驗(yàn)條件及操作方法等多個(gè)方面,深入探討影響細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率的主要原因。 一、細(xì)胞本身的因素 1. 細(xì)胞種類與特性細(xì)胞的種類、來源和代次等基本特性直接決定了其轉(zhuǎn)染的難易程度。一些...
買的細(xì)胞回來先復(fù)蘇細(xì)胞,復(fù)蘇完細(xì)胞以后就在顯微鏡下觀察一下,如果細(xì)胞背景有黑色的話,那說明細(xì)胞本來就是臟的。就不建議培養(yǎng)了。但是如果復(fù)蘇了一天以后再去看才發(fā)現(xiàn)背景有黑膠蟲在動,這個(gè)時(shí)候就需要排除很多因素了,比如說是否細(xì)胞本來就是污染的,是否是完培污染了,是否是操作不當(dāng)。但是如果第1天看了的話,至少可以排出一個(gè)選項(xiàng),那就是細(xì)胞本身是不是就是污染的,跟我們操作關(guān)系就沒有那么大大了,至少會給點(diǎn)信心...
先回答這個(gè)問題,進(jìn)入細(xì)胞房需要換鞋。?再跟大家分享一下在網(wǎng)上看到有同學(xué)說的自己之前養(yǎng)細(xì)胞的事情,以前進(jìn)細(xì)胞房從不換鞋的,細(xì)胞從沒出過問題。到一個(gè)老師和我說不換鞋特容易支原體污染影響表型和代謝。想到最近細(xì)胞半死不活的,加上后續(xù)有幾個(gè)蠻重要的實(shí)驗(yàn),決定立刻實(shí)行換鞋制度!結(jié)果....這周一開始實(shí)行,周四細(xì)胞就長出好幾坨真菌,嚇得直接扔了!那這其中真菌是從哪來的呢?小編猜這位同學(xué)應(yīng)該是換鞋的時(shí)候摸完...
在基因工程領(lǐng)域,基因遞送是一個(gè)核心環(huán)節(jié),它涉及將外源基因?qū)肽繕?biāo)細(xì)胞,以實(shí)現(xiàn)基因治療、基因表達(dá)調(diào)控或細(xì)胞功能研究等目的。細(xì)胞轉(zhuǎn)染是實(shí)現(xiàn)基因遞送的重要技術(shù)手段之一,其中化學(xué)方法因其操作簡便、效率較高而廣受歡迎。本文將探討基因遞送的化學(xué)方法——細(xì)胞轉(zhuǎn)染,以及胎牛血清在這一過程中的作用,并解析為何選擇優(yōu)質(zhì)的胎牛血清至關(guān)重要。基因遞送的化學(xué)方法細(xì)胞轉(zhuǎn)染細(xì)胞轉(zhuǎn)染技術(shù)主要分為化學(xué)法、物理法和生物學(xué)法三大...
細(xì)胞轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn),是將外源性基因?qū)爰?xì)胞內(nèi)的一種實(shí)驗(yàn)專門技術(shù)。這項(xiàng)技術(shù),猶如一座橋梁,巧妙地將外部世界的分子構(gòu)建(涵蓋DNA序列、RNA片段及蛋白質(zhì)等)準(zhǔn)確地導(dǎo)入至真核細(xì)胞的內(nèi)部。它不僅在解鎖基因功能奧秘的過程中扮演著關(guān)鍵角色,還是實(shí)現(xiàn)基因編輯的準(zhǔn)確實(shí)踐、基因表達(dá)高效調(diào)控的重要手段。因此,在基因科學(xué)、生物技術(shù)及醫(yī)學(xué)研究的廣闊領(lǐng)域內(nèi),轉(zhuǎn)染技術(shù)已成為一種重要且廣泛應(yīng)用的方法,持續(xù)推動著科學(xué)前沿的邊界...
腦卒中會對大腦造成不可逆的損傷,是全球第二大致死原因。全球每年大約有1500萬人發(fā)生腦卒中,僅次于心臟病。缺血性腦卒中是指因腦血流減少或腦供氧不足造成的腦組織死亡,約占所有腦卒中病例的85%。目前的治療方法主要是恢復(fù)血流,但這必須在24小時(shí)內(nèi)完成,只有小部分患者能夠做到。由于人們對腦梗死后的細(xì)胞過程并未完全了解,因此仍然缺乏治療方法來促進(jìn)腦卒中后的神經(jīng)組織再生。近日,維也納醫(yī)科大學(xué)的研究人員...
在細(xì)胞生物學(xué)研究中,細(xì)胞作為基本的單位,是眾多研究的基石,了解細(xì)胞特性、優(yōu)化培養(yǎng)方案,是保障實(shí)驗(yàn)結(jié)果穩(wěn)定準(zhǔn)確的基本原則。本期內(nèi)容,讓我們走進(jìn)細(xì)胞研究中的祖細(xì)胞與干細(xì)胞,探索二者之間的緊密聯(lián)系與區(qū)別,揭秘其高效培養(yǎng)的秘密。干細(xì)胞:生命的源泉干細(xì)胞,被譽(yù)為“生命的種子”,是一類具有自我更新能力和多向分化潛能的細(xì)胞。它們能夠分化成多種類型的細(xì)胞,為生物體的生長、發(fā)育和修復(fù)提供源源不斷的動力。根據(jù)分...
細(xì)胞焦亡是一種溶解性細(xì)胞死亡模式,有助于限制感染的傳播,也與無菌炎性疾病和自身免疫性疾病的病理有關(guān)。在焦亡過程中,炎性體的激活和caspase-1的參與導(dǎo)致細(xì)胞死亡,同時(shí)炎癥細(xì)胞因子白介素-1β (IL-1β)的成熟和分泌。IL-1β在促進(jìn)組織炎癥中的主導(dǎo)作用掩蓋了從熱噬細(xì)胞釋放的其他因子的潛在影響。 近日,發(fā)表在《Nature》上的,標(biāo)題為:“Oxylipins and metabolit...
倫敦醫(yī)學(xué)科學(xué)實(shí)驗(yàn)室(LMS)和劍橋分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室(LMB)這兩家由英國醫(yī)學(xué)研究委員會(Medical Research Council)核心資助的研究機(jī)構(gòu)的研究人員進(jìn)行了一次優(yōu)雅的合作,解決了一個(gè)長達(dá)數(shù)十年的謎團(tuán),這可能為未來更好的癌癥治療鋪平道路。這項(xiàng)工作揭示了我們最重要的DNA修復(fù)系統(tǒng)之一如何識別DNA損傷并啟動修復(fù)的基本機(jī)制,多年來一直困擾著研究人員。利用尖端成像技術(shù)可視化這些DNA...
動物細(xì)胞培養(yǎng)和人體細(xì)胞培養(yǎng)在本質(zhì)上沒有根本性的區(qū)別,因?yàn)槿梭w細(xì)胞本身就是動物細(xì)胞的一種。然而,在具體的操作和應(yīng)用上,兩者可能會存在一些細(xì)微的差別,主要體現(xiàn)在以下幾個(gè)方面:1. 細(xì)胞來源動物細(xì)胞培養(yǎng):可以從各種動物體內(nèi)取出相應(yīng)的組織或器官,經(jīng)過處理得到所需的細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)。這些動物可以是實(shí)驗(yàn)動物(如小鼠、大鼠、兔子等),也可以是其他具有研究價(jià)值的動物。人體細(xì)胞培養(yǎng):細(xì)胞來源**于人體,通常是從患...