動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的目的多種多樣，涵蓋了科學(xué)研究、醫(yī)學(xué)應(yīng)用、生物技術(shù)產(chǎn)業(yè)等多個(gè)領(lǐng)域。以下是幾個(gè)主要的目的：基礎(chǔ)科學(xué)研究：細(xì)胞生物學(xué)研究：通過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)，科學(xué)家可以在體外控制條件下研究細(xì)胞的生長(zhǎng)、分裂、分化、代謝、遺傳等基本生命過(guò)程。生理與病理機(jī)制探索：利用細(xì)胞培養(yǎng)模型，研究疾病的發(fā)生、發(fā)展機(jī)制，以及藥物對(duì)細(xì)胞的作用機(jī)制。藥物研發(fā)與篩選：藥物篩選：在細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng)中測(cè)試新藥物或化合物的毒性、有效性和作用...
在細(xì)胞培養(yǎng)中，PBS（Phosphate Buffered Saline，磷酸鹽緩沖液）發(fā)揮著至關(guān)重要的作用。以下是對(duì)PBS在細(xì)胞培養(yǎng)中作用的具體歸納：一、提供穩(wěn)定的pH環(huán)境pH緩沖能力：PBS具有優(yōu)異的pH緩沖能力，其pH值通常維持在7.2-7.4之間，這一范圍與人體血液等滲，非常適合細(xì)胞生長(zhǎng)。在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，由于代謝活動(dòng)的進(jìn)行，培養(yǎng)液的pH值可能會(huì)發(fā)生變化，而PBS能夠有效地吸收或釋放...
支原體污染的細(xì)胞不可以用來(lái)做實(shí)驗(yàn)。以下是詳細(xì)的原因分析：一、支原體污染對(duì)細(xì)胞的影響細(xì)胞生長(zhǎng)和形態(tài)改變：支原體污染會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢、形態(tài)改變，甚至引起細(xì)胞死亡。支原體可以大量消耗培養(yǎng)基中的營(yíng)養(yǎng)和細(xì)胞代謝的基礎(chǔ)成分，如核酸前體、氨基酸、維生素、脂質(zhì)、膽固醇等，導(dǎo)致細(xì)胞增殖緩慢及各種代謝、功能紊亂甚至喪失。細(xì)胞膜完整性破壞：支原體還會(huì)吸附在細(xì)胞表面，破壞細(xì)胞膜的完整性，更有少數(shù)類型支原體可進(jìn)入細(xì)...
單核細(xì)胞作為免疫系統(tǒng)的重要組成部分，在炎癥反應(yīng)、抗原呈遞及病原體清除等過(guò)程中發(fā)揮著關(guān)鍵作用。單核細(xì)胞的活化狀態(tài)對(duì)于理解機(jī)體免疫應(yīng)答機(jī)制及疾病進(jìn)程具有重要意義。核酸法，特別是基于聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）及其衍生技術(shù)的核酸分析，為單核細(xì)胞活化測(cè)試提供了一種高靈敏度、高特異性的方法。本文將探討如何利用核酸法進(jìn)行單核細(xì)胞活化測(cè)試的基本原理、操作步驟及應(yīng)用前景。 一、核酸法測(cè)試單核細(xì)胞活化的基本原理單核...
PCR（Polymerase Chain Reaction）即聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，是指在DNA聚合酶催化下，以母鏈DNA為模板，以特定引物為延伸起點(diǎn)，通過(guò)變性、退火、延伸等步驟，體外復(fù)制出與母鏈模板DNA互補(bǔ)的子鏈DNA的過(guò)程。今天跟大家分享的是PCR的組成部分?！衩撗跄０錎NA用于復(fù)制的PCR模板可以是任何DNA來(lái)源，如基因組DNA（gDNA）、互補(bǔ)DNA（cDNA）和質(zhì)粒DNA。DNA的組成...
單核細(xì)胞活化測(cè)試（Monocyte Activation Test，簡(jiǎn)稱MAT）是一種體外檢測(cè)方法，主要用于評(píng)估供試品中是否存在能夠激活單核細(xì)胞釋放促炎細(xì)胞因子的污染物，如內(nèi)毒素、細(xì)菌、病毒、真菌等。這些污染物在人體內(nèi)可能引發(fā)發(fā)熱等不良反應(yīng)，因此單核細(xì)胞活化測(cè)試在藥品、生物制品、醫(yī)療器械等領(lǐng)域的安全性評(píng)價(jià)中具有重要意義。 測(cè)試原理單核細(xì)胞活化測(cè)試基于單核細(xì)胞或單核細(xì)胞系在受到外源性致熱原（如...
核細(xì)胞活化測(cè)試（Monocyte Activation Test，簡(jiǎn)稱MAT）作為一種體外檢測(cè)方法，其應(yīng)用領(lǐng)域主要集中在藥品、生物制品、醫(yī)療器械等需要嚴(yán)格安全性評(píng)價(jià)的產(chǎn)品上。具體來(lái)說(shuō)，單核細(xì)胞活化測(cè)試可以在以下幾個(gè)方面得到應(yīng)用：1. 藥品安全性評(píng)價(jià)· 藥物熱原檢測(cè)：在藥品生產(chǎn)過(guò)程中，可能存在的內(nèi)毒素、微生物等污染物會(huì)引發(fā)人體發(fā)熱等不良反應(yīng)。單核細(xì)胞活化測(cè)試能夠檢測(cè)這些污染物對(duì)單核細(xì)胞的激活作...
2023年12月，《EMBO JOURNAL》上發(fā)表論文：“CDK11 requires a critical activator SAP30BP to regulate pre-mRNA splicing”“CDK11需要一個(gè)關(guān)鍵的激活子SAP30BP來(lái)調(diào)節(jié)pre-mRNA剪接”論文摘要：CDK11是一個(gè)新興的癌癥治療藥物靶點(diǎn)，因?yàn)樗诹姿峄P(guān)鍵轉(zhuǎn)錄和剪接因子以及促進(jìn)癌細(xì)胞細(xì)胞周期進(jìn)程中發(fā)...
照過(guò)紫外線的FBS（胎牛血清）在細(xì)胞培養(yǎng)中可能會(huì)帶來(lái)一系列問(wèn)題，以下是對(duì)此情況的詳細(xì)分析：一、紫外線照射對(duì)胎牛血清的影響生物活性成分的穩(wěn)定性：胎牛血清中含有多種生長(zhǎng)因子、激素等生物活性成分，這些成分對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)和增殖至關(guān)重要。紫外線照射，特別是UV-C紫外線，可能對(duì)這些生物活性成分的結(jié)構(gòu)造成破壞，導(dǎo)致它們失活或功能降低。這種影響可能會(huì)降低血清在細(xì)胞培養(yǎng)中的效果。蛋白質(zhì)降解：胎牛血清中的蛋白質(zhì)...
判斷胎牛血清（FBS）是否好用，可以從以下幾個(gè)方面進(jìn)行綜合評(píng)估：一、外觀特性顏色：根據(jù)血紅蛋白含量的不同，胎牛血清可表現(xiàn)出黃色或紅色。我國(guó)的細(xì)胞培養(yǎng)用血清標(biāo)準(zhǔn)是不高于20mg/dl（或30mg/dl，不同標(biāo)準(zhǔn)可能有所不同），但顏色深淺對(duì)血清質(zhì)量無(wú)直接影響，主要反映采血過(guò)程的嚴(yán)謹(jǐn)規(guī)范程度。國(guó)產(chǎn)血清多呈現(xiàn)明亮的蠟黃色，而進(jìn)口血清則可能因溶血現(xiàn)象而略顯淡黃或微紅。此外，熱滅活或保存不當(dāng)?shù)难蹇赡艹?..
在生物學(xué)領(lǐng)域，細(xì)胞器作為細(xì)胞內(nèi)執(zhí)行特定功能的基本單位，一直是科學(xué)家們研究的熱點(diǎn)。然而，除了廣為人知的線粒體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體和核糖體外，還有許多冷門但同樣重要的細(xì)胞器等待我們?nèi)ヌ剿?。本文將介紹幾種冷門的細(xì)胞器及其研究現(xiàn)狀，帶領(lǐng)讀者一窺這些細(xì)胞內(nèi)部未解之謎。1. 遷移體（Migrasome）遷移體是一種由清華大學(xué)俞立實(shí)驗(yàn)室發(fā)現(xiàn)并命名的新型細(xì)胞器，因其獨(dú)特的“石榴樣”結(jié)構(gòu)而備受關(guān)注。遷移體是遷移...
在細(xì)胞生物學(xué)和分子生物學(xué)領(lǐng)域，細(xì)胞器作為細(xì)胞內(nèi)執(zhí)行特定功能的基本單位，其研究對(duì)于理解生命活動(dòng)的本質(zhì)和疾病機(jī)制至關(guān)重要。而在這一過(guò)程中，培養(yǎng)基的組成，特別是胎牛血清（Fetal Bovine Serum, FBS）的品質(zhì)，直接影響著細(xì)胞培養(yǎng)的效果和實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。本文將從多個(gè)角度探討為何細(xì)胞器研究需要品質(zhì)更高的胎牛血清。一、提供豐富的生長(zhǎng)因子和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)細(xì)胞器功能的正常發(fā)揮依賴于細(xì)胞整體的健康...
RNA定量PCR分析，即實(shí)時(shí)熒光定量PCR（Quantitative Real-time PCR, qPCR）技術(shù)，是一種用于測(cè)定樣品中RNA（尤其是mRNA和microRNA）的原始拷貝數(shù)量的分子生物學(xué)方法。該技術(shù)通過(guò)結(jié)合PCR的擴(kuò)增能力和熒光信號(hào)的實(shí)時(shí)檢測(cè)，實(shí)現(xiàn)了對(duì)RNA分子的精確定量分析。以下是RNA定量PCR分析的詳細(xì)介紹：一、定義與原理RNA定量PCR分析利用PCR反應(yīng)體系中的熒光...
Actin作為內(nèi)參的原理主要基于其作為管家基因的高度保守性和在細(xì)胞中的廣泛表達(dá)。以下是對(duì)Actin作為內(nèi)參原理的詳細(xì)闡述：一、定義Actin作為內(nèi)參，是指為了衡量基因組數(shù)據(jù)的可靠性，使用序列保守性來(lái)測(cè)定從基因組中提取的某些基因（如actin基因）的表達(dá)水平作為參考。二、原理高度保守性：Actin基因在生物演化過(guò)程中具有高度的保守性，這意味著其序列在不同物種甚至同一物種的不同個(gè)體間都相對(duì)穩(wěn)定，...
在分子生物學(xué)研究領(lǐng)域，實(shí)時(shí)熒光定量PCR（qPCR）技術(shù)因其高靈敏度、高特異性和定量分析的能力，成為科研和臨床應(yīng)用中不可或缺的工具。然而，為了確保qPCR結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性，定期對(duì)qPCR儀進(jìn)行校準(zhǔn)十分重要。本文將探討qPCR儀的校準(zhǔn)方法及其背后的原理。qPCR儀校準(zhǔn)的必要性qPCR儀作為精密的實(shí)驗(yàn)設(shè)備，其性能的穩(wěn)定性和準(zhǔn)確性直接影響到實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性。由于儀器使用過(guò)程中的磨損、環(huán)境變化以...
在分子生物學(xué)研究中，實(shí)時(shí)熒光定量PCR（qPCR）技術(shù)已成為一項(xiàng)不可或缺的工具，廣泛應(yīng)用于基因表達(dá)譜分析、病原體檢測(cè)、遺傳變異研究及環(huán)境監(jiān)測(cè)等領(lǐng)域。qPCR以其高靈敏度、高特異性和實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)能力，極大地推動(dòng)了生物醫(yī)學(xué)研究的進(jìn)步。然而，為了確保qPCR結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性，定期對(duì)qPCR儀進(jìn)行校準(zhǔn)顯得尤為重要。qPCR技術(shù)的基本原理qPCR，即實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，是在經(jīng)典PCR技術(shù)基礎(chǔ)上...
中國(guó)藥典對(duì)牛血清檢測(cè)的流程是一個(gè)系統(tǒng)而嚴(yán)謹(jǐn)?shù)倪^(guò)程，旨在確保牛血清的質(zhì)量和安全性。以下是根據(jù)中國(guó)藥典要求，牛血清檢測(cè)可能涉及的主要流程：一、樣品接收與準(zhǔn)備樣品接收：接收來(lái)自生產(chǎn)廠家的牛血清樣品，檢查樣品包裝是否完好，標(biāo)簽是否清晰，記錄樣品信息。樣品準(zhǔn)備：根據(jù)檢測(cè)需求，對(duì)樣品進(jìn)行預(yù)處理，如稀釋、分裝等。二、外觀與物理性質(zhì)檢查顏色與澄清度：觀察血清的顏色是否正常，是否澄清無(wú)沉淀。pH值測(cè)定：使用p...
B細(xì)胞成熟抗原（BCMA）作為一種在多發(fā)性骨髓瘤（MM）細(xì)胞表面高度表達(dá)的特異性靶標(biāo)，近年來(lái)已成為MM免疫治療的重要靶點(diǎn)。準(zhǔn)確測(cè)定BCMA特異性靶標(biāo)對(duì)于理解其在MM發(fā)生發(fā)展中的作用、開發(fā)靶向治療藥物以及評(píng)估治療效果具有重要意義。本文將詳細(xì)介紹幾種常用的測(cè)定BCMA特異性靶標(biāo)的方法及其應(yīng)用。BCMA的結(jié)構(gòu)與功能BCMA是一種跨膜蛋白，由胞外段、跨膜區(qū)和胞內(nèi)段三個(gè)主要結(jié)構(gòu)域組成。在正常人體組織中...
白色念珠菌污染細(xì)胞在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中是一個(gè)常見(jiàn)問(wèn)題，它可能導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)結(jié)果的不準(zhǔn)確性，并影響科研工作的進(jìn)行。白色念珠菌污染細(xì)胞的表現(xiàn)主要包括以下幾個(gè)方面：一、細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境的改變培養(yǎng)基外觀變化：被白色念珠菌污染的培養(yǎng)基可能會(huì)變得渾濁，顏色可能發(fā)生變化，如出現(xiàn)白色或灰色的菌絲生長(zhǎng)。培養(yǎng)基表面生長(zhǎng)：白色念珠菌在培養(yǎng)基表面形成明顯的菌落，這些菌落可能呈現(xiàn)為白色、奶油色或灰色，質(zhì)地柔軟且易于擴(kuò)散。二、細(xì)胞生...
在基因治療和細(xì)胞療法中，特別是CAR-T細(xì)胞療法和TCR-T細(xì)胞療法，載體拷貝數(shù)（Vector Copy Number, VCN）是一個(gè)至關(guān)重要的參數(shù)。它直接關(guān)系到細(xì)胞治療產(chǎn)品的安全性和有效性。VCN指的是外源基因載體整合到宿主細(xì)胞基因組中的拷貝數(shù)，過(guò)高的VCN可能會(huì)增加致癌風(fēng)險(xiǎn)，而過(guò)低的VCN則可能影響基因表達(dá)效率。因此，準(zhǔn)確測(cè)定轉(zhuǎn)導(dǎo)細(xì)胞中的VCN對(duì)于細(xì)胞治療產(chǎn)品的質(zhì)量控制和臨床應(yīng)用具有重...
我們對(duì)細(xì)胞代謝的認(rèn)識(shí)有一個(gè)明顯的差距:在許多情況下，我們?nèi)匀徊恢罓I(yíng)養(yǎng)物質(zhì)是如何被運(yùn)送到細(xì)胞中的。如果不了解這一點(diǎn)，開發(fā)與驅(qū)動(dòng)新陳代謝的蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白相關(guān)的許多疾病的治療方法，即使不是不可能，也是極其困難的?，F(xiàn)在，《自然遺傳學(xué)》上的一項(xiàng)新研究提出了一種更精確地繪制這些代謝基因功能的工具。這個(gè)名為GeneMAP的平臺(tái)已經(jīng)確定了線粒體代謝核心的一個(gè)關(guān)鍵基因代謝物關(guān)聯(lián)。GeneMAP是由洛克菲勒大...
DNA提取是分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)步驟，其質(zhì)量和純度直接影響后續(xù)實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性和可靠性。常見(jiàn)的DNA提取方法有純化柱提取法和磁珠法。本文將介紹這兩種方法的技術(shù)原理及其優(yōu)缺點(diǎn)。 純化柱提取DNA純化柱提取法（Silica Column-based Extraction）是基于DNA在特定條件下對(duì)硅膠膜的親和性來(lái)分離和純化的。其主要步驟如下： 裂解細(xì)胞：利用裂解液破壞細(xì)胞膜和細(xì)胞核，釋放DNA。結(jié)合...
細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室的老師都知道，血清的質(zhì)量對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)至關(guān)重要。但是剛進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室的同學(xué)可能不太了解，今天跟大家分享就是如何花一樣的錢，挑選好的胎牛血清?！ ⊙逶诩?xì)胞培養(yǎng)中起到如下作用： 1. 提供細(xì)胞生長(zhǎng)代謝所需的生長(zhǎng)因子、激素等活性成分和各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì); 2. 提供結(jié)合蛋白，通過(guò)結(jié)合維生素、脂質(zhì)、微量元素和激素等成分，調(diào)節(jié)這些成分的釋放與活性; 3. 解毒和抗氧化功能; 4. 提供細(xì)胞貼...
Taq聚合酶，也被稱為Taq DNA聚合酶，是一種重要的分子診斷工具，廣泛應(yīng)用于PCR（聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)）擴(kuò)增、DNA標(biāo)記、引物延伸等領(lǐng)域。以下是對(duì)Taq聚合酶的詳細(xì)介紹：一、基本信息中文名：Taq聚合酶外文名：Taq DNA polymerase本質(zhì)：DNA聚合酶來(lái)源：水生棲熱菌（Thermus aquaticus）發(fā)現(xiàn)者：托馬斯·D·布洛克（Thomas D. Brock）團(tuán)隊(duì)于1965年...
細(xì)胞支原體污染檢測(cè)引物主要用于聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）法檢測(cè)細(xì)胞培養(yǎng)物中的支原體污染。引物的設(shè)計(jì)通常基于支原體16S rRNA基因或其他高度保守的核酸序列區(qū)域，這些區(qū)域在支原體種類間具有特異性，能夠確保檢測(cè)的準(zhǔn)確性和靈敏度。常用的支原體檢測(cè)引物對(duì)在細(xì)胞支原體污染檢測(cè)中，常用的引物對(duì)包括但不限于以下幾種：27F和1492R27F：5'-AGAGTTTGATCCTGGCTCAG-3'1492R：5...
