細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中，除了常規(guī)的細(xì)胞培養(yǎng)、細(xì)胞染色、細(xì)胞分離與融合、細(xì)胞功能檢測、細(xì)胞信號傳導(dǎo)與基因編輯等研究方法外，還有多種重要的研究方法。這些方法在細(xì)胞生物學(xué)研究中發(fā)揮著關(guān)鍵作用，有助于深入了解細(xì)胞的結(jié)構(gòu)、功能和生命活動規(guī)律。以下是一些重要的細(xì)胞實(shí)驗(yàn)研究方法： 一、顯微技術(shù)顯微技術(shù)是觀察細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)的基本方法，包括光學(xué)顯微鏡、電子顯微鏡和掃描隧道顯微鏡等。 光學(xué)顯微鏡：普通光學(xué)顯微鏡可以觀察細(xì)胞的...
在支原體提取中，EDTA（乙二胺四乙酸）的作用和用途主要體現(xiàn)在以下幾個方面：一、EDTA的基本性質(zhì)EDTA是一種有機(jī)化合物，無臭無味，熔點(diǎn)為250℃（分解），常溫常壓下為白色粉末。它能溶于氫氧化鈉、碳酸鈉及氨溶液中，也能溶于沸水，但微溶于冷水，不溶于醇及一般有機(jī)溶劑。EDTA是一種重要的絡(luò)合劑，能與多種金屬離子形成穩(wěn)定的絡(luò)合物。二、EDTA在支原體提取中的具體作用螯合金屬離子：EDTA是一種...
締一生物提供的Ausbian特級胎牛血清(貨號：WS500T)，已助力多項科研成果發(fā)表。今天跟大家分享的就是一篇利用Ausbian胎牛血清培養(yǎng)人皮膚成纖維細(xì)胞BJ Cell的文獻(xiàn)。 該論文發(fā)表在《Inflammation》標(biāo)題為：Specific Knockdown of the NDUFS4 Gene Reveals Important Roles of Ferroptosis in UV...
7月20日，國際學(xué)術(shù)期刊Nature Communications在線發(fā)表了中國科學(xué)院分子細(xì)胞科學(xué)**創(chuàng)新中心（生物化學(xué)與細(xì)胞生物學(xué)研究所）陳劍峰研究組和同濟(jì)大學(xué)生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院/附屬養(yǎng)志康復(fù)醫(yī)院林昶東課題組的最新合作研究成果“Ca2+ transients on the T cell surface trigger rapid integrin activation in a times...
細(xì)菌有特殊的防御機(jī)制來保護(hù)自己免受病毒的侵害，CRISPR-Cas系統(tǒng)就是其中之一。研究領(lǐng)域的各路高手紛紛大力于開發(fā)源于不同細(xì)菌中的各種CRISPR-Cas系統(tǒng)，已經(jīng)成為分子診斷技術(shù)的豐富資源。位于德國維爾茨堡的亥姆霍茲RNA感染研究所(HIRI)的研究人員又進(jìn)一步開發(fā)了一種新方法來擴(kuò)展這個CRISPR-Cas工具箱。他們的新方法，——簡稱為PUMA（ (Programmable tracr...
在細(xì)胞生物學(xué)和生物醫(yī)學(xué)研究領(lǐng)域，細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)是一項至關(guān)重要的技術(shù)。其中，細(xì)胞消化作為細(xì)胞培養(yǎng)過程中的一個關(guān)鍵環(huán)節(jié)，對細(xì)胞傳代、實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備及后續(xù)研究具有不可忽視的作用。 一、什么是細(xì)胞消化？細(xì)胞消化是指通過特定的物理、化學(xué)或生物方法，將已經(jīng)貼壁生長或聚集的細(xì)胞從培養(yǎng)基質(zhì)上解離下來，形成單個細(xì)胞懸液的過程。這一過程不僅有助于細(xì)胞的傳代培養(yǎng)，還為后續(xù)的細(xì)胞實(shí)驗(yàn)（如增殖、凋亡、遷移、分化等）提供了必要...
在生物醫(yī)學(xué)和細(xì)胞生物學(xué)研究中，細(xì)胞培養(yǎng)是一項基礎(chǔ)而核心的技術(shù)。它不僅為科學(xué)家提供了觀察和研究細(xì)胞行為、生理、病理過程的平臺，還是藥物研發(fā)、基因治療等領(lǐng)域不可或缺的實(shí)驗(yàn)手段。完整的細(xì)胞培養(yǎng)全流程涉及多個精心設(shè)計的步驟，其中，胎牛血清（Fetal Bovine Serum, FBS）作為培養(yǎng)基的關(guān)鍵成分，其選擇和使用對細(xì)胞培養(yǎng)的成功至關(guān)重要。完整的細(xì)胞培養(yǎng)全流程1、準(zhǔn)備階段：設(shè)備清洗與消毒：確保...
在任何實(shí)驗(yàn)室中使用多種細(xì)胞系都會導(dǎo)致一種細(xì)胞系被另一種細(xì)胞系污染的可能性。培養(yǎng)物的交叉污染困擾著許多研究人員，經(jīng)常導(dǎo)致錯誤的結(jié)果、結(jié)果的撤回、掩蓋以及在無意中使用錯誤的細(xì)胞后數(shù)據(jù)和結(jié)果的一些徹頭徹尾的“偽造”。1960年代和1970年代科研工作者初步意識到這不是一個微不足道的問題，當(dāng)時觀察到許多細(xì)胞系已被**個建立的人類細(xì)胞系HeLa細(xì)胞交叉污染。這種情況已經(jīng)發(fā)生到一定程度，以至于許多細(xì)...
在21世紀(jì)生物醫(yī)學(xué)的廣闊領(lǐng)域中，干細(xì)胞研究無疑發(fā)揮著重要作用。近日，發(fā)表在《Nature》上，標(biāo)題為：“Metabolic regulation of species-specific developmental rates”的文章，科研人員里用多能干細(xì)胞建立了一個體外系統(tǒng)，該系統(tǒng)能夠模擬小鼠和人類胚胎之間兩倍的發(fā)育速率差異。該系統(tǒng)通過體節(jié)發(fā)生時鐘的周期來定量測定發(fā)育速度，體節(jié)發(fā)生時鐘是一種...
在病毒學(xué)研究的廣闊領(lǐng)域中，細(xì)胞實(shí)驗(yàn)扮演著至關(guān)重要的角色，它們不僅是病毒復(fù)制和傳播的重要平臺，也是揭示病毒與宿主細(xì)胞相互作用機(jī)制的關(guān)鍵工具。而在這一系列復(fù)雜而精細(xì)的實(shí)驗(yàn)中，胎牛血清（Fetal Bovine Serum, FBS）作為細(xì)胞培養(yǎng)中的關(guān)鍵成分，其質(zhì)量和特性直接影響著實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。本文旨在探討胎牛血清在病毒學(xué)細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中的關(guān)鍵角色及其所需滿足的嚴(yán)格要求。一、無病毒污染：安全...
在國家自然科學(xué)基金項目（批準(zhǔn)號：82250002、31861143026、21825701）等資助下，中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院血液學(xué)研究所王建偉教授團(tuán)隊聯(lián)合北京大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院伊成器教授團(tuán)隊在造血干細(xì)胞 衰老機(jī)制研究方面取得進(jìn)展。相關(guān)成果以“衰老相關(guān)的非經(jīng)典TRMT6-TRMT61A 信號傳導(dǎo)損傷造血干細(xì)胞（Age-related non-canonical TRMT6-TRMT61A signa...
核酸雜交技術(shù)，又稱核酸分子雜交技術(shù)，是指兩條或多條互補(bǔ)的核酸鏈（DNA與DNA、DNA與RNA、RNA與RNA等）在適當(dāng)條件下通過Watson-Crick堿基配對原則結(jié)合形成雙鏈的過程。這一過程的原理基于核酸序列的互補(bǔ)性，即腺嘌呤(A)與胸腺嘧啶(T)之間形成兩個氫鍵，鳥嘌呤(G)與胞嘧啶(C)之間形成三個氫鍵。在核酸雜交過程中，互補(bǔ)的兩條核酸鏈通過堿基間的氫鍵相連，形成穩(wěn)定的雙鏈結(jié)構(gòu)，從而...
在細(xì)胞培養(yǎng)和保存過程中，支原體污染是一個常見且棘手的問題。支原體是一類微小的原核生物，它們能夠附著在細(xì)胞表面或通過細(xì)胞膜進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)，對細(xì)胞生長和實(shí)驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生顯著影響。對于需要長期保存和頻繁復(fù)蘇的凍存細(xì)胞而言，防止支原體污染尤為重要。本文將從多個方面探討如何有效避免凍存細(xì)胞被支原體污染。 一、源頭控制：確保起始細(xì)胞的無菌狀態(tài)1.嚴(yán)格篩選起始細(xì)胞在進(jìn)行細(xì)胞凍存之前，必須確保起始細(xì)胞的無菌狀態(tài)。這...
細(xì)胞復(fù)蘇是生物學(xué)和醫(yī)學(xué)研究中一項至關(guān)重要的技術(shù)，它涉及將凍存在液氮或-70℃冰箱中的細(xì)胞解凍后重新培養(yǎng)，使細(xì)胞恢復(fù)生長的過程。然而，細(xì)胞復(fù)蘇過程中存在許多因素可能影響其成功率。本文將探討如何提高細(xì)胞復(fù)蘇的成功率，從準(zhǔn)備工作、操作過程到后續(xù)管理，提供一系列實(shí)用的建議。一、充分的前期準(zhǔn)備1. 選擇合適的凍存管使用內(nèi)旋設(shè)計的凍存管可以減少因液氮流入導(dǎo)致的爆炸風(fēng)險。如果只有外旋的凍存管，取出后應(yīng)盡快...
締一生物提供的Ausbain特級胎牛血清來自澳洲進(jìn)口血源，十余年來助力多個科研新進(jìn)展，廣受科研人員好評。今天為大家分享的就是使用Ausbain特級胎牛血清在2023年月1月2日，在《Cell Proliferation》上發(fā)表的論文，標(biāo)題為：“Antigen-specific TCR-T cells from Rag2 gene-deleted pluripotent stem cells ...
基因編輯技術(shù)是十分重要的分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)，需要對實(shí)驗(yàn)環(huán)境進(jìn)行嚴(yán)格的的控制，防治雜質(zhì)核酸污染。德國MB公司生產(chǎn)的PCR Clean，即用型噴霧試劑，可以清除實(shí)驗(yàn)環(huán)境中的核酸污染。 DdmDE系統(tǒng)的結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)是理解其質(zhì)粒消除機(jī)制的關(guān)鍵。根據(jù)當(dāng)前的研究，DdmDE系統(tǒng)的結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)可以詳細(xì)描述如下：一、系統(tǒng)組成DdmDE系統(tǒng)由兩個主要組件組成：DdmD和DdmE。 DdmD：一種解旋酶-核酸酶融合蛋白，具...
近年來，隨著生物技術(shù)的飛速發(fā)展，科學(xué)家們在基因編輯和防御系統(tǒng)領(lǐng)域取得了諸多突破性進(jìn)展。哥倫比亞大學(xué)的研究人員利用低溫電子顯微鏡（cryo-EM）深入研究了霍亂弧菌中的DdmDE防御系統(tǒng)，揭示了其質(zhì)粒消除的分子機(jī)制。這一發(fā)現(xiàn)不僅為理解原核生物如何抵御外來遺傳元件提供了新視角，也為未來基因工程工具的開發(fā)奠定了基礎(chǔ)。分子生物學(xué)需要嚴(yán)格控制實(shí)驗(yàn)室中的衛(wèi)生，避免發(fā)生核酸污染，德國MB公司生產(chǎn)的PCR ...
雖然COVID-19疫苗使許多人接觸到基于RNA的藥物，但RNA寡核苷酸已經(jīng)在市場上用于治療杜氏肌營養(yǎng)不良癥和淀粉樣變性等疾病多年。與傳統(tǒng)的小分子藥物相比，RNA療法具有許多優(yōu)勢，包括它們能夠處理細(xì)胞內(nèi)幾乎任何遺傳成分，并引導(dǎo)CRISPR等基因編輯工具到達(dá)目標(biāo)。 然而，核糖核酸的前景目前受到全球快速增長的需求超過該行業(yè)生產(chǎn)能力的限制。化學(xué)合成RNA的標(biāo)準(zhǔn)方法是在20世紀(jì)80年代發(fā)明的，...
在進(jìn)行PCR擴(kuò)增時，發(fā)現(xiàn)部分樣本的擴(kuò)增曲線呈現(xiàn)斜直線型，而非正常的平滑S型曲線。這種異常曲線表明PCR反應(yīng)可能存在問題，導(dǎo)致擴(kuò)增效率不穩(wěn)定或擴(kuò)增產(chǎn)物非特異性。 原因分析：管蓋未蓋緊：由于每天處理的標(biāo)本量較大，操作人員在加樣后可能未將PCR管蓋緊，導(dǎo)致在擴(kuò)增過程中反應(yīng)液蒸發(fā)，管內(nèi)體積減少。這不僅改變了讀取熒光的標(biāo)準(zhǔn)，還可能導(dǎo)致探針濃度增加，進(jìn)而形成斜直線型擴(kuò)增曲線。耗材問題：使用的PCR反應(yīng)管...
跑PCR結(jié)果總不滿意的原因是多方面的，涉及引物設(shè)計、模板DNA質(zhì)量、PCR反應(yīng)條件、實(shí)驗(yàn)室操作以及儀器狀態(tài)等多個環(huán)節(jié)。以下是一些常見的PCR結(jié)果不滿意狀況及其原因分析：一、PCR結(jié)果不滿意的常見狀況1.無擴(kuò)增產(chǎn)物 原因分析：引物設(shè)計不當(dāng)(如特異性差、引物間存在互補(bǔ)性)、模板DNA質(zhì)量差(如降解、污染)、PCR反應(yīng)條件設(shè)置錯誤(如退火溫度不合適、循環(huán)次數(shù)不足)、酶失活或未加入酶等。2.非特異性...
長鏈非編碼RNA (Long non-coding rna, lncRNAs)是數(shù)量最多、種類很多的一類非編碼RNA。它們定位于細(xì)胞核、細(xì)胞質(zhì)或兩個區(qū)室，并通過多種機(jī)制在多個水平上調(diào)控基因表達(dá)。LncRNAs往往比蛋白質(zhì)編碼基因進(jìn)化得更快，并且具有更高的組織和發(fā)育階段特異性表達(dá)。lncRNA最初被認(rèn)為是錯誤轉(zhuǎn)錄的副產(chǎn)物，沒有生物學(xué)功能，現(xiàn)在被認(rèn)為參與了許多生物學(xué)過程，如免疫反應(yīng)、細(xì)胞凋亡、多...
hiPSC：人類誘導(dǎo)多能干細(xì)胞的培養(yǎng)與應(yīng)用 人類誘導(dǎo)多能干細(xì)胞（hiPSC）是一類通過基因編輯技術(shù)（如CRISPR-Cas9）對已經(jīng)高度分化的人體細(xì)胞進(jìn)行重新逆分化得到的多能性干細(xì)胞。這類細(xì)胞具有自我更新和分化成多種細(xì)胞類型的能力，為科學(xué)家在疾病模型構(gòu)建、藥物篩選及再生醫(yī)學(xué)等領(lǐng)域提供了強(qiáng)大的工具。 hiPSC的培養(yǎng)方法hiPSC的培養(yǎng)過程復(fù)雜且需要精細(xì)操作，但現(xiàn)代技術(shù)的發(fā)展已經(jīng)大大簡化了這一...
來自新加坡-麻省理工學(xué)院研究與技術(shù)聯(lián)盟(SMART)的研究人員，麻省理工學(xué)院在新加坡的研究企業(yè)，已經(jīng)開發(fā)出一種新的方法來生產(chǎn)臨床劑量的可存活的自體嵌合抗原受體(CAR) T細(xì)胞的超小型自動化封閉系統(tǒng)微流控芯片，大約是一副紙牌的大小。這是**利用微生物反應(yīng)器生產(chǎn)自體細(xì)胞治療產(chǎn)品。具體來說，新方法成功地用于制造和擴(kuò)增CAR-T細(xì)胞，這些細(xì)胞與使用現(xiàn)有系統(tǒng)在更小的占地面積和更少的空間中生產(chǎn)的細(xì)胞一...
過量的間質(zhì)和癌癥相關(guān)成纖維細(xì)胞(CAF)促進(jìn)癌癥進(jìn)展并促進(jìn)免疫逃避。對基質(zhì)操縱免疫微環(huán)境的機(jī)制的深入了解有助于改善癌癥的治療。 發(fā)表在《Cancer Research》上，標(biāo)題為“Stromal Reprogramming through Dual PDGFRα/β Blockade Boosts the Efficacy of Anti-PD-1 Immunotherapy in Fibr...
qPCR檢測支原體對細(xì)胞數(shù)有一定的要求，但這一要求通常是通過細(xì)胞沉淀中的DNA量來體現(xiàn)的，而不是直接通過細(xì)胞數(shù)量來規(guī)定。具體來說，進(jìn)行qPCR檢測時，需要保證樣本中的DNA含量足夠，以便能夠準(zhǔn)確地進(jìn)行擴(kuò)增和檢測。在支原體qPCR檢測中，如果以細(xì)胞沉淀為樣本，通常需要加干冰/冰袋寄送2~3管PBS洗滌后的細(xì)胞沉淀，并保證每管的細(xì)胞數(shù)量≥10^6個。這是為了確保提取的DNA量足夠用于qPCR反應(yīng)...
