質粒轉染是分子生物學研究中常用的技術之一，然而其成功率受到多種因素的影響。本文綜合了目前常見的有效方法，旨在提高質粒轉染細胞的成功率。主要方法包括細胞的優化處理、質粒的優化處理以及轉染條件的優化，通過這些方法的綜合應用，可以有效提高質粒轉染細胞的成功率。 在分子生物學和基因工程研究中，質粒轉染細胞是一項重要的技術手段，常用于基因表達、功能驗證等實驗。然而，由于細胞自身特性、質粒品質和轉染條件...
細胞在更換胎牛血清后，為了更好地適應新的培養環境，可以采取以下措施：確保無菌操作：細胞在體外培養時，缺乏機體免疫系統的保護，因此容易受到微生物的污染。在更換血清時，必須確保工作區域的無菌，使用無菌試劑和培養基，并遵循嚴格的無菌操作程序，以避免細胞受到污染。維持適宜的溫度：細胞對溫度非常敏感，一般哺乳類與禽類細胞在體外培養的適宜溫度是37～38℃。因此，更換血清后，需要確保細胞培養箱的溫度穩定...
母親和女兒之間有著強烈的聯系，但你知道這種親密關系的聯系一直延伸到細胞水平嗎？在細胞分裂的過程中，新的子細胞從母細胞中繼承遺傳物質和其他分子的混合物。這種遺傳既包括有益的成分，可以幫助它們在生命中有一個強健的開端，也包括潛在的有害突變或受損分子，對新生的子細胞構成重大挑戰。子細胞如何管理和減輕有害遺傳的影響仍然是一個謎。馬克斯普朗克免疫生物學和表觀遺傳學研究所的一項研究現在揭示了一種復雜的機...
胎牛血清PBS緩沖液在實驗室研究和應用中具有多重作用。首先，它可以作為培養基的添加劑，幫助細胞附著和擴散，促進細胞的生長和分裂。這對于細胞培養和實驗至關重要。其次，胎牛血清PBS緩沖液能起到緩沖和pH調節的作用，維持培養基的酸堿平衡，從而創造適合細胞生長的環境。這有助于維持細胞正常運作所需的生理條件。此外，胎牛血清中還含有一些生物活性物質，如延緩細胞凋亡的因子，這些物質有助于減少細胞培養過程...
高通量PCR和普通PCR在多個方面存在顯著的差異：設計目的與功能：高通量PCR，作為二代測序技術的一部分，設計初衷是為了測序，具有極高的通量，能夠一次擴增多種DNA。這種技術通過邊合成邊測序，如emPCR等方法，實現高通量檢測。相較之下，普通PCR主要應用于對樣本中某一基因進行相對或絕對定量，以測定某種DNA的含量。常見的方法有taqman探針法和sybrgreenI染料法。技術優化與特性：...
動物血清在多個領域都發揮著重要的作用，以下是一些主要的作用：提供營養物質：動物血清中包含水、無機鹽、維生素、糖類、脂肪、氨基酸和纖維素等營養成分，這些都可以供應給體外培養的動物細胞。盡管這些營養物質在血清中的含量相對較少，但它們對于細胞的基本生存和增殖是必需的。激素和生長因子供應：血清中含有多種激素，如胰島素、生長激素等，以及各種生長因子，如表皮生長因子、成纖維細胞生長因子等。這些激素和生長...
牛血清的質量控制要點主要包括以下幾個方面：采集管理：建立地點固定、質量穩定、時間長久的新生牛源血清的采集點，以確保血清來源的穩定性和可追溯性。同時，對采集的動物健康狀況進行檢測和監測，保證血清的質量和安全性。嚴格監管：采血和分離過程應嚴格在處理好的器皿中進行，采用一牛一容器的封閉式操作方式，確保采血人員的操作符合各項規章制度。離心機在生產中要按標準化規范操作，以保證血清精制除菌過濾的工藝處理...
質粒構建是分子生物學中常見的實驗技術，用于構建含有特定基因序列的質粒。這項工作在基因工程、基因表達調控等領域有著廣泛的應用。然而，在進行質粒構建實驗時，有一些關鍵點需要特別注意，同時清除雜質DNA污染也是至關重要的。讓我們深入探討這些關鍵點。 關鍵點一：DNA片段的選擇與設計在質粒構建實驗中，首先要選擇和設計合適的DNA片段。這可能包括： 目標基因序列：需要明確要構建的基因或基因片段的序列，...
分子生物學實驗在現代生命科學研究中起著至關重要的作用，可以幫助科學家們理解生物體內分子水平的各種過程。然而，實驗的準確性對于得出可靠的結果至關重要。以下是常見的分子生物學實驗以及提高實驗準確性的方法。 常見的分子生物學實驗PCR (聚合酶鏈式反應)：用于擴增特定DNA片段，常用于基因檢測、DNA克隆等。 凝膠電泳 (Gel Electrophoresis)：用于分離DNA、RNA或蛋白質等分...
基因研究和分子生物學密不可分，它們共同推動了我們對生命的理解，開啟了解碼生物遺傳信息的大門。然而，在分子生物學的實驗中，尤其是基因研究領域，雜質DNA污染可能對實驗結果產生嚴重影響。因此，保障實驗的準確性和可靠性，避免雜質DNA污染至關重要。 基因研究與分子生物學的密切關系基因研究和分子生物學是緊密相關的學科領域，它們共同致力于研究生物體內基因的結構、功能和調控。基因是生物體遺傳信息的基本單...
基因研究和分子生物學密切相關，分子生物學研究需要保持實驗室的干凈整潔無污染。德國MB公司生產的PCR Clean，高效清除分子生物學實驗室中的核酸污染，為提高實驗準確性提供保障。 使用高通量代謝組學平臺的全基因組關聯分析已經導致對人類代謝生物學的新見解。對全身代謝的遺傳決定因素的詳細了解對于揭示遺傳途徑如何影響生物機制和復雜疾病十分重要。 近日，科研人員提出了一項全基因組關聯研究，通過核磁...
發現細胞先天免疫記憶中的DNA變化可能有助于對抗人類最致命的敵人之一——敗血癥。“敗血癥是一個非常可怕的負擔，不僅在死亡率方面，而且在金錢方面。這是美國最昂貴的醫療條件，大約每年200億美元，幾乎是第二高的兩倍，”弗吉尼亞理工大學總統博士后研究員布萊克·考德威爾說。作為《細胞報告》(Cell Reports)上發表的一項研究的主要作者，考德威爾和他的團隊證明，DNA結構和組織的變化會在單核細...
核酸和PCR在生物學和醫學領域都有著廣泛的應用，但它們的應用場景存在一些差異。核酸檢測主要用于檢測各種標本中的病原體核酸，是判斷人體是否感染某種病原體的重要臨床檢驗方法。它廣泛應用于感染性疾病的診斷，如新型冠狀病毒、乙型肝炎病毒、人類免疫缺陷病毒等的檢測。此外，核酸檢測也適用于一些核酸變異的病原學生物，以及那些難以通過培養方法進行分離的微生物。通過核酸檢測，可以判斷病毒的復制量，從而評估病情...
一篇新的研究論文發表在Aging (MEDLINE/PubMed列出的“Aging (Albany NY)”和Web of Science列出的“Aging- us”)第16卷第4期，題為“單細胞RNA-seq揭示了活化蛋白c對阿爾茨海默病的轉錄組調節”。單細胞RNA測序揭示了阿爾茨海默病(AD)模型5xFAD (5x家族性AD突變)與野生型(WT)小鼠細胞群的變化。在這項新的研究中，來自南...
進行PCR實驗室消除核酸污染操作時，除了上述提到的步驟外，還需要注意以下幾點：個人防護：在清潔和消毒過程中，操作人員應穿戴好防護服、手套、口罩等防護裝備，避免直接接觸污染物。分區操作：PCR實驗室應劃分不同區域，如試劑準備區、樣本處理區、擴增區等，避免不同區域的交叉污染。消除污染時，也需按照區域分別處理。使用專用清潔工具：使用專用的清潔工具和設備，避免與其他區域的清潔工具混用，防止交叉污染。...
牛血清的來源在細胞培養和生物醫學研究中確實非常重要。血清是一種復雜的混合物，含有多種生物活性成分，如生長因子、激素、免疫因子、營養成分等。這些成分對于維持細胞的正常生長、增殖和分化至關重要。牛血清通常來源于成年牛、小牛、胎牛等不同發育階段的牛只。不同來源的牛血清在成分和特性上可能存在差異，因此它們對細胞培養的影響也會有所不同。例如，胎牛血清通常含有較高的生長因子和較低的免疫因子水平，這使得它...
實時熒光定量PCR儀的原理主要基于聚合酶鏈式反應（PCR）和熒光信號的實時監測。PCR是一種體外擴增特定DNA片段的技術，通過高溫變性、低溫退火和適溫延伸的循環過程，使得目的基因片段得以迅速擴增。在實時熒光定量PCR中，特定的熒光基團被加入到PCR反應體系中，這些熒光基團可以是熒光染料或是與特定序列結合的熒光探針。隨著PCR循環的進行，熒光基團與目標DNA的結合量也隨之增加，從而發出熒光信號...
成體干細胞因其自我更新和分化為其他細胞類型的能力而引起了極大的科學興趣。在《Nature Communications》上發表的一篇文章中，研究人員揭示了一種調節腸道干細胞增殖和分化的新機制。他們的研究強調了一種微rna的表觀遺傳調控在腸干細胞向成熟腸細胞分化過程中的重要作用。表觀遺傳修飾在不改變DNA序列的情況下影響基因表達。它們會受到環境因素、生活方式和衰老的影響，而且往往是可逆的。來自...
眾所周知，氧化應激在心血管疾病，糖尿病，脂肪肝和衰老發生發展過程中起著重要作用。二甲基精氨酸二甲胺水解酶1(DDAH1)不僅是降解非對稱二甲基精氨酸(ADMA)關鍵酶，還在維持氧化還原穩態中發揮重要作用，但作用機制尚不清楚。在2024年2月9日，新春佳節來臨之際，生命學院陸忠兵課題組在國際知名期刊Redox Biology上在線發表了一篇題名“DDAH1 recruits peroxired...
免疫檢查點蛋白就像免疫系統的剎車，可阻止免疫系統攻擊不該攻擊的東西。然而，有些腫瘤會劫持這些蛋白質，并利用它們形成一種盾牌，抵御免疫系統的識別。免疫療法的作用是關閉這些剎車，讓人體去攻擊癌細胞。斯坦福大學和紐約大學的研究人員近日發表了免疫檢查點蛋白LAG-3的結構。他們詳細描述了LAG-3的結構，以及這種蛋白如何發揮作用。這項研究成果發表在《美國國家科學院院刊》（PNAS）上。盡管目前有十幾...
懸浮細胞培養是一種重要的細胞培養技術，特別適用于培養懸浮在培養基中的細胞，如淋巴細胞、造血干細胞等。長期以來，胎牛血清被廣泛應用于懸浮細胞培養中，提供了必要的營養物質、生長因子和細胞黏附所需的支持。1. 提供營養物質蛋白質：胎牛血清含有大量蛋白質，包括生長因子、激素、膠原蛋白等，為細胞生長和分裂提供必要的營養。碳水化合物：提供能量來源，維持細胞的生理功能。氨基酸：是蛋白質合成的基本單元，幫助...
除了無菌技術，影響細胞培養結果的因素還有很多，這些因素涵蓋了物理、化學和生物學的多個方面。以下是一些主要的影響因素：培養基的組成：培養基為細胞提供生長所需的營養和生長因子。培養基的類型、成分比例以及pH值都會影響細胞的生長和分化。溫度：大多數哺乳動物細胞的培養溫度通常在36.5~37.5℃，偏離這個范圍可能會影響細胞的代謝和生長速度。同時，溫度的變化也可能導致細胞的損傷或死亡。氣體環境：細胞...
研究人員發現了一種引導多細胞生命進化的機制。他們確定了蛋白質折疊改變是如何驅動多細胞進化的。在一項由赫爾辛基大學和佐治亞理工學院的研究人員領導的新研究中，科學家們求助于一種叫做實驗進化的工具。在正在進行的多細胞長期進化實驗(MuLTEE)中，實驗室酵母正在進化出新的多細胞功能，使研究人員能夠研究它們是如何產生的。這項研究將重點放在了理解進化過程中蛋白質的調節上。“通過證明蛋白質水平變化對促進...
半個世紀前，科學家吉姆·沃森(Jim Watson)和阿列克謝·奧洛夫尼科夫(Alexey Olovnikov)各自意識到，我們的DNA復制存在一個問題。線性DNA復制的一個怪癖決定了保護染色體末端的端粒應該在每一輪復制中變得更短，這種現象被稱為末端復制問題。一個解決方案出現了:Liz Blackburn和Carol Greider發現了端粒酶，一種將端粒重復序列添加到染色體末端的酶。洛克菲...
支原體是一類細菌樣微生物，被發現會對細胞培養產生不良影響。在成體干細胞培養中，支原體污染可能導致一系列問題，包括細胞功能異常、實驗結果的不準確性甚至實驗數據的喪失。本文將探討支原體污染對成體干細胞培養的影響，并提出相應的解決方案。 1. 支原體污染簡介支原體是一類小型細菌樣微生物，可感染宿主細胞并進行復制。這些微生物不同于常見的細菌或病毒，因為它們缺乏細胞壁，且擁有較小的基因組。支原體污染可...
