10月16日,國際心臟研究學會官方雜志Journal of Molecular and Cellular Cardiology在線發表了中國科學院上海營養與健康研究所楊黃恬研究團隊題為“Human embryonic stem cell-derived cardiovascular progenitor cells stimulate cardiomyocyte cell cycle act...
內參基因,也被稱為管家基因(house-keeping genes),是一類在生物體的各種組織和細胞中持續并穩定表達的基因。這些基因的表達水平在不同樣本間相對穩定,因此常被用作標準化樣本和校正實驗數據的參照物,以消除實驗中因上樣量、操作等因素產生的誤差,確保實驗結果的準確性。內參基因的選擇對于實驗結果的可靠性至關重要。一個理想的內參基因應該具備以下特點:在各種組織和細胞中表達穩定,不受生長發...
qPCR技術(實時熒光定量PCR)中的絕對定量與相對定量是兩種不同的定量方法,它們之間存在明顯的區別。以下是對這兩種定量方法的詳細比較:
一、定義與原理
絕對定量
定義:測定待測樣本中目的基因的準確拷貝數。
原理:用已知拷貝數的標準品繪制標準曲線,將待測樣本目的基因的Ct值(循環閾值,即熒光信號強度達到預設閾值時所經歷的擴增循環數)帶入標準曲線中,進而獲得樣本中目的基因的準確拷貝數。
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qPCR(實時熒光定量PCR)檢測支原體的判斷標準主要基于Ct值(循環閾值)以及熒光通道的信號情況。以下是一個詳細的判斷標準:
一、Ct值判斷標準
Ct值是指熒光信號強度達到預設閾值時所經歷的擴增循環數。在qPCR檢測支原體時,通常設定一個Ct值的判斷標準來區分陽性結果和陰性結果。
陽性結果:如果檢測的Ct值小于某個設定的閾值(如40),則表明PCR結果陽性,即樣本中存在支原體DNA。
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熊本大學的研究人員通過在體外復制造血干細胞(hsc)的發育過程,在干細胞生物學方面取得了突破性進展。這種培養系統不僅增強了我們對造血干細胞如何發育的理解,而且還導致了一種新工具的開發,這種工具可能在未來的干細胞治療和血液疾病治療中發揮重要作用。造血干細胞(hsc)是人體一生中產生血細胞的主要來源,其發育經歷了幾個階段。由分子胚胎學和遺傳學研究所的Minetaro Ogawa教授和Saori ...
支原體DNA抽提試劑盒是一種專門用于從樣本中提取支原體DNA的工具,它在生命科學研究和臨床診斷中發揮著重要作用。以下是對支原體DNA抽提試劑盒作用的詳細闡述:一、作用原理支原體DNA抽提試劑盒通過一系列化學反應和物理操作,將樣本中的支原體DNA釋放出來并進行純化。這些試劑盒通常包含裂解緩沖液、蛋白酶K、洗滌緩沖液、去離子水、Elution緩沖液等多種試劑,它們協同作用以完成DNA的提取過程。...
在細胞生物學、遺傳學、組織工程及藥物篩選等多個科研領域,細胞培養箱作為一種至關重要的實驗設備,為細胞提供了一個體外生長和增殖的模擬環境。這一環境不僅需要適宜的溫度和濕度,還需要精確調控的氣體比例,以確保細胞的健康生長和實驗數據的準確性。本文將深入探討細胞培養箱中氣體比例的調控原則、常見設定及其對細胞生長的影響。氣體比例的重要性細胞培養箱中的氣體比例,特別是氧氣和二氧化碳的濃度,對細胞的生長、...
在細胞生物學領域,細胞凍存是一種重要的保存細胞活性的技術。這一過程中,二甲基亞砜(DMSO)作為抗凍保護劑,發揮著至關重要的作用。本文將深入探討DMSO在細胞凍存過程中的作用及其分子機制。DMSO的基本特性DMSO是一種無色、無味、高滲透性的液體,能夠迅速穿透細胞膜。其高度的滲透能力使其能夠進入細胞內,與水分子結合,形成穩定的溶液。這種特性使得DMSO成為理想的細胞凍存保護劑。DMSO在細胞...
在細胞生物學研究和臨床應用中,細胞的長期保存和復蘇是至關重要的環節。如何有效地保存細胞并保持其活性和功能,對于細胞治療、疾病研究以及藥物篩選等領域具有重大意義。而在細胞凍存與解凍的過程中,一個關鍵的原則就是“慢凍快融”。本文將探討這一原則背后的科學原理。慢凍:保護細胞免受冰晶損傷在細胞凍存過程中,降溫速度對細胞的存活率有著重要影響。如果直接將細胞暴露在極低的溫度下,如直接放入-196℃的液氮...
動物細胞培養時必須加入血清。原因主要有以下幾點:
提供必需的生長調節因子:血清中含有多種細胞生存和增殖所必需的生長調節因子,這些因子對于細胞的正常生長和分裂至關重要。
補充營養成分:雖然合成培養基已經包含了細胞所需的大部分營養物質,但仍有一些成分可能不足或缺失。血清能夠補充這些缺失或不足的營養成分,確保細胞能夠獲得全面的營養支持。
提供貼壁生長的基質成分:對于貼壁細胞來說,血清中含有一些...
在細胞實驗室里,大家對血清已經不陌生了,但如何保存和正確的使用血清,避免那些讓人頭疼的沉淀問題呢?今天我們就來探討一下,血清的正確使用方法。
儲存方式:未開封的血清,一般建議-20°C凍存。大瓶裝的血清如果一次用不完的話,建議無菌分裝,分裝后的血清仍-20°C凍存。,避免反復凍融。分裝后,再次冷凍前要確保血清均勻。若置于4°C的血清,應在一周內用完。為保證更好的細胞培養效果,血清和培養基的...
為什么說選擇血清很重要呢!其中有一點很重要那就是內毒素的含量。由于內毒素直接參與細胞凋亡,對細胞培養結果影響較大,且不同批次的血清,內毒素差異又不易控制。 有下列情況者,對血清內毒素應格外留意篩選:1.養干細胞時,干細胞對內毒素非常敏感,如果血清中內毒素≥3EU/ml時,干細胞很容易死亡。很多使用者,在血清在試用前,就通過提早審核該批次《檢測報告》,以決定是否入圍進行試用。2.養免疫細胞時,...
胎牛血清(Fetal Bovine Serum,FBS)作為細胞培養中用量**的天然培養基,其質量和穩定性對實驗結果具有重要影響。為了確保胎牛血清的效能,低溫保存成為了一個至關重要的環節。本文將詳細探討為何胎牛血清需要低溫保存,以及這一措施帶來的多方面益處。1. 抑制微生物生長,保持無菌性低溫環境能夠有效減緩或阻止細菌和其他微生物的生長。胎牛血清在采集和處理過程中雖然經過嚴格的無菌操作,但在...
在每個細胞內部,被稱為微管細胞骨架的微絲網絡有助于維持細胞的形狀,允許細胞分裂,并將重要物質從細胞的一個部分運送到另一個部分。形成這個網絡的細絲被稱為微管,它們是中空的管,充當支架結構和運輸軌道。長期以來,科學家們一直對細胞如何控制這些微管的形成感到好奇,這是健康細胞功能和分裂所必需的過程。這是一個重要的問題,因為微管也是化療殺死癌細胞的主要目標。兩個研究小組,一個在生物醫學研究所(IRB ...
在細胞培養過程中,胰蛋白酶扮演著至關重要的角色,它負責細胞的消化和分離。然而,胰蛋白酶的活性必須得到精確控制,以避免對細胞造成過度損傷。在這一環節,胎牛血清(Fetal Bovine Serum, FBS)以其獨特的生物化學特性,成為終止胰蛋白酶活性、保護細胞免受過度消化的重要物質。本文將深入探討胎牛血清如何發揮其作用,終止胰蛋白酶的活性,并終止細胞消化。胎牛血清的生物化學特性胎牛血清是通過...
PCR(聚合酶鏈式反應)擴增過程中需要一種耐高溫的酶,這主要歸因于PCR技術的特殊循環過程和對酶的特殊要求。以下是對這一需求的詳細解釋:一、PCR擴增的循環過程
PCR擴增主要包括三個步驟:高溫變性、低溫退火和中溫延伸。
高溫變性:DNA雙鏈在93℃左右的高溫下分離成單鏈,以便與引物結合。
低溫退火:溫度降至55℃左右,引物與模板DNA單鏈的互補序列進行配對結合。
中溫延伸:在70℃...
胎牛血清在細胞培養中扮演著至關重要的角色,因此,對其進行的病毒檢測標準也極為嚴格。以下是關于胎牛血清病毒檢測標準的詳細解析:一、檢測項目胎牛血清的病毒檢測項目通常涵蓋一系列可能存在的病毒,包括但不限于:牛副流感3型病毒(PI-3)牛病毒性腹瀉病毒(BVD)牛細小病毒這些病毒一旦存在于血清中,將對宿主細胞造成嚴重的損害,甚至威脅實驗人員的安全。二、檢測標準病毒檢測結果必須為陰性:對于上述提到的...
胎牛血清(Fetal Bovine Serum, FBS)作為細胞培養中的重要試劑,其質量和穩定性對于細胞生長和維持細胞功能至關重要。為了確保胎牛血清的活性和質量不受損害,科學合理的儲存方法顯得尤為重要。其中,將胎牛血清儲存在-20攝氏度恒定溫度環境下,是確保其長期保存有效性的關鍵措施。一、溫度對胎牛血清的影響溫度是影響胎牛血清儲存質量的關鍵因素之一。長期的溫度波動可能導致血清中的蛋白質發生...
在生命科學的發展歷程中,細胞培養技術一直扮演著重要的角色。而胎牛血清,作為細胞培養中的重要添加劑,其應用歷史和發展過程充滿了探索與創新。本文將詳細探討胎牛血清用于細胞培養的發展歷程,從最初的探索到如今的廣泛應用,以及未來可能的發展方向。起源與初步探索19世紀末至20世紀初,隨著生命科學的逐步發展,科學家們開始有了在體外培養細胞的想法。然而,當時的細胞培養技術尚處于萌芽階段,科學家們對于如何維...
在生物醫學領域,核酸污染是一個不容忽視的問題。無論是生物制藥、生物醫學研究、臨床檢測,還是生物技術服務,微量的核酸污染都可能對實驗結果、產品質量和安全性產生嚴重影響。因此,核酸污染祛除類試劑在這些企業中發揮著至關重要的作用。一、保障實驗結果的準確性在生物醫學研究中,PCR(聚合酶鏈式反應)等核酸擴增技術是常用的實驗手段。然而,微量的核酸污染便可能導致假陽性擴增結果,從而影響實驗結果的準確性。...
聚合酶鏈反應(PCR)實驗是分子生物學領域中的一項核心技術,用于擴增特定的DNA或RNA片段。然而,由于其高度敏感性,PCR實驗極易受到各種形式的污染,特別是核酸污染。核酸污染不僅會影響實驗結果的準確性,還可能誤導后續的研究和分析。因此,在進行PCR實驗時,必須高度警惕可能出現的核酸污染跡象,并采取相應的應對措施。一、需警惕的核酸污染跡象1. 非特異性擴增非特異性擴增是PCR實驗中常見的污染...
支原體檢測方法中,培養法和PCR法各有其優缺點,準確性也受多種因素影響,因此無法一概而論哪種方法更準確。
培養法是一種經濟可靠的方法,通過培養基上的細胞培養觀察細胞的生長和變化,可以準確地檢測出支原體感染。然而,由于支原體的生長緩慢,培養法的實驗周期較長,通常需要幾周甚至幾個月的時間。此外,培養法對實驗室環境的要求較高,需要專業的技術人員進行操作。這些因素限制了培養法的快速應用和廣泛普及...
在開創性的藥物開發中,能夠輕松快速編輯負責藥物功效的關鍵原子的新技術被視為一項基礎和“夢想”技術,徹底改變了發現潛在候選藥物的過程。韓國科學技術院(KAIST)的研究人員在世界上**成功開發出了使藥物效果**化的單原子編輯技術。8日,韓國科學技術院表示,化學學系樸允秀教授研究組成功開發出了將呋喃化合物中的氧原子編輯為氮原子,直接轉化為制藥領域廣泛使用的吡咯骨架的技術。 該研究在10月3日的權...
細胞實驗在科學研究中扮演著至關重要的角色,然而,其結果的重復性問題一直是科研人員面臨的重大挑戰。據Nature reviews drug discovery上的一篇分析顯示,已發表的臨床前研究(主要基于細胞實驗結果)中,僅有21%的結果可以完全重復,這反映了細胞實驗的極大不穩定性。本文將探討細胞實驗重復率低的原因,并提出相應的解決方案。細胞實驗重復率低的原因1. 細胞和培養條件的差異:細胞試...
T細胞免疫療法已經成功地治療了一些難治性癌癥,但由于T細胞在長時間刺激后無法持續存在,因此存在局限性。St. Jude兒童醫院的研究人員采用了一種反向翻譯的方法來探究調節T細胞對檢查點阻斷免疫療法反應持久性的分子機制。受骨髓增生異常綜合征患者臨床觀察的啟發,利用T細胞耗竭實驗模型確定了與克隆性造血( clonal hematopoiesis)相關的表觀遺傳調節因子——Dnmt3a、Tet2和...