DNA復溶液，作為分子生物學實驗中的關鍵試劑，其穩定性和保存條件對于實驗結果具有直接影響。正確保存DNA復溶液，不僅可以確保其活性與完整性，還能提高實驗效率，減少實驗誤差。本文旨在探討DNA復溶液的保存策略與實踐，為科研工作者提供實用指導。一、DNA復溶液的基本特性DNA復溶液通常指將純化的DNA片段溶解于特定緩沖液中形成的溶液。這些緩沖液通常包含pH穩定劑、鹽類以及可能的DNA穩定劑，如E...
當廚師開發出一種新食譜時，他們會有條不紊地添加和刪除各種食材，看看每一種食材如何改變最終的菜肴。當科學家試圖了解基因在體內的作用時，他們采用了類似的策略，即基因組編輯。目前，他們工具箱中***的工具是CRISPR，其應用范圍從癌癥治療到鐮狀細胞性貧血和β-地中海貧血等遺傳性疾病的治療然而，這種基因組編輯主食仍有其局限性。維爾紐斯大學的基因組生物學家Tautvydas Karvelis說：“將...
在PCR（聚合酶鏈式反應）中，引物是啟動DNA復制的關鍵組成部分。引物的設計至關重要，其長度是一個需要仔細考慮的因素。如果PCR引物過長，可能會導致以下一系列問題：特異性降低：引物越長，能夠配對的概率理論上會減少，但同時引物與非目標序列的匹配機會也會增加，這可能導致PCR產物的非特異性擴增。非特異性擴增會導致PCR產物的雜交、非特異性條帶或假陽性等問題，從而影響結果的準確性。擴增效率降低：長...
在生物制品和細胞治療產品的質量控制中，支原體檢測是重要的一環。傳統的支原體檢測方法包括培養法和DNA染色法，然而，隨著技術的進步，核酸擴增技術（NAT）因其快速、靈敏和便捷的特點，逐漸受到行業內的青睞。NAT法在藥典中的使用并非毫無限制，其檢測限的設定，成為了一個重要的考量因素。 NAT法檢測限的設定背景NAT法，如聚合酶鏈反應（PCR）和實時熒光定量PCR（qPCR），通過擴增支原體的特定...
2024年10月22日，方顯楊研究員在《Current Opinion in Structural Biology》期刊在線發表了題為"Empowering the molecular ruler techniques with unnatural base pair system to explore conformational dynamics of flaviviral RNAs"的...
CFU（Colony Forming Unit）即菌落形成單位，是微生物學中用來估算樣品中活的細菌或真菌細胞數量的單位。CFU測定在多種情況下被廣泛應用，以下是CFU測定的主要應用場景：一、食品科學在食品科學中，CFU的測定對于評估食品的衛生質量、判斷食品是否受到污染以及預測食品的保質期等方面具有重要意義。通過測定食品樣本中的CFU數量，可以了解食品中微生物的分布和活性水平，從而判斷食品是否...
植物由于固著生長的特性，在生長發育過程中會面臨多種環境變化。為了適應復雜的外界環境，植物進化出一系列精密的機制。在逆境條件下，植物往往犧牲自身的生長以增強生存能力。通過調控生長發育及脅迫響應相關基因的表達，植物能夠更有效地適應外部環境變化，實現生長與脅迫響應之間的平衡。過去的研究主要集中在轉錄水平，然而其中的翻譯調控機制仍知之甚少。核糖體作為細胞內的翻譯機器，是蛋白質合成的重要場所，且容易受...
近年來，生物醫藥領域取得了飛速進步，細胞治療等項目已成為該領域的焦點。與此同時，為確保生物制品的安全性和可靠性，各國法規及相關監管機構正不斷強化對其的監督力度。其中，一個關鍵的問題就是“如何對生物制品進行檢測，以確保產品的生物安全”。對于涉及細胞培養的生物制品生產工藝，各國法規均明確規定了相應的檢測標準與要求。
歐洲藥典（EP）和日本藥典（JP）中規定的生物制品支原體檢測的方法主要包括...
支原體污染細胞后的檢測方法有多種，以下是一些常用的檢測方法：試劑盒檢測法：使用專門用于支原體檢測的試劑盒，通過細胞滴片進行檢測。此方法簡便快捷，是常用的初步篩選手段。觀察細胞形態和生長特征：在支原體污染較嚴重時，可觀察到細胞生長減慢，培養基pH變酸，并出現細胞病變。但由于支原體污染引起的病變特征與病毒感染相似，因此不能作為**診斷依據。分離培養法：從可疑的細胞培養體系中取樣，并接種到最適宜支...
小牛血清在某些情況下可以代替胎牛血清進行細胞培養，但需要考慮多種因素。以下是對兩者在細胞培養中應用的詳細比較：一、來源與成分胎牛血清：來源：從未接觸外界環境的胎牛體內提取。成分：富含蛋白質、氨基酸、脂質、糖類等多種營養物質，以及多種生長因子和激素，如胰島素樣生長因子、表皮生長因子等。小牛血清（通常指犢牛血清）：來源：取自新生牛（小牛）的血。成分：雖然也含有一定的營養成分和生長因子，但可能略遜...
在人類中，主要的分子能量載體是三磷酸腺苷（ATP）。它對整個身體的細胞功能，尤其是大腦的細胞功能至關重要。它的合成發生在線粒體中，通過氧化磷酸化（OXPHOS）是一個復雜的，多步驟的過程。當這一過程中的一個或多個要素發生故障時，可能導致ATP產生不平衡或活性氧（ROS）過量產生。這可能導致包括蛋白質和DNA在內的幾種細胞生物分子的氧化損傷，最終可能導致細胞死亡。在大腦中，這種不平衡會導致問題...
CFU，全稱Colony Forming Unit，即菌落形成單位，是微生物學中用于估算細菌、真菌等微生物數量的一個單位。它代表在特定條件下（如特定的培養基、溫度、濕度等），一個單位的體積（如1毫升或1克）的樣品經過培養后，能夠形成的肉眼可見的菌落數量。CFU/ml這一術語用于描述在特定體積（如1毫升）的液體樣品中，通過培養所能形成的菌落數量。簡而言之，CFU/ml代表了每毫升菌液中微生物的...
支原體標準品在支原體檢測過程中，特別是在定量聚合酶鏈式反應（qPCR）檢測中，發揮著至關重要的作用。以下是對支原體標準品作用的詳細闡述：一、驗證檢測方法的準確性和可重復性支原體標準品是已知濃度的支原體樣本，通常包含特定支原體物種的基因組DNA，并經過嚴格的質量控制和驗證。在qPCR檢測中，支原體標準品作為已知濃度的參考樣本，可用于驗證實驗室分析方法的準確性和可重復性。通過與標準品進行對比，實...
動物細胞培養時，血清起著至關重要的作用。具體來說，血清在動物細胞培養中的作用主要包括以下幾個方面：提供基本營養物質：血清中含有豐富的蛋白質（如白蛋白和球蛋白）、氨基酸、葡萄糖等，這些都是細胞生長和增殖所必需的基本營養物質。其中，氨基酸是細胞合成蛋白質的基本成分，有些氨基酸是動物細胞本身不能合成的，必須由培養液提供。提供激素和各種生長因子：血清中含有多種激素，如胰島素、生長激素等，以及多種生長...
在生物技術和制藥領域，細胞和生物制品的支原體污染是一個需要高度關注的問題。支原體是一類微小的原核生物，其污染可能導致產品質量下降，甚至引發嚴重的安全問題。因此，歐洲藥典（EP）和日本藥典（JP）都對細胞和生物制品的支原體檢測做出了詳細的規定，并強調了方法學驗證的重要性。支原體檢測的描述歐洲藥典和日本藥典均指出，無論是生物源性原材料、采用細胞培養技術制備的疫苗、抗體，還是細胞或基因治療產品，在...
qPCR（熒光定量PCR）檢測中出現“None”的情況，可能由多種原因導致。以下是一些可能的原因及其解釋： 擴增曲線異常：如果擴增曲線不正常，CT值可能顯示“Undetermined”，進而在結果中表現為“None”。這可能是由于多種因素導致的擴增失敗，如引物設計不合理、模板質量差、反應條件不適宜等。 熒光信號未采集：在每個擴增循環結束后，如果沒有設置熒光信號的收集步驟，那么儀器將無法檢測到...
細胞房支原體污染確實存在傳染的風險。支原體是一種細菌樣微生物，細胞內寄生體，可以感染人類和動物，引起多種疾病。它們具有高度的傳染性和致病性，可以通過多種途徑進行傳播。在細胞培養環境中，支原體污染可能通過直接接觸受污染的細胞培養物、使用被支原體污染的器材或試劑，以及空氣傳播等方式進行傳染。此外，如果實驗室人員未嚴格遵守無菌操作規范，也可能將支原體帶入細胞培養環境中，從而引發污染。對于人體而言，...
慢病毒載體作為一種重要的基因轉移工具，在醫學領域具有廣泛的應用價值。其高效感染、穩定整合、安全性和表達可調等特點，使其在疾病治療、基因改造等多個方面表現出優越性。然而，慢病毒載體的檢測卻面臨諸多挑戰，尤其是在靈敏度、準確性和定量性方面的要求極高。在這一背景下，數字PCR（dPCR）技術因其獨特的優勢，成為慢病毒載體檢測的理想選擇。dPCR是一種核酸分子絕對定量技術，其基本原理是將含有DNA模...
DNA提取在PCR實驗中至關重要。以下是對其重要性的詳細分析：一、提高PCR反應的靈敏度通過細胞裂解和DNA提取，可以將DNA從細胞中釋放出來并純化。這一步驟確保了PCR反應能夠檢測到微量的DNA樣本，從而提高了PCR反應的靈敏度。這使得PCR技術能夠應用于更多需要高靈敏度的場景，如疾病診斷、遺傳病篩查等。二、保證PCR反應的特異性細胞內的其他成分，如蛋白質、RNA等，可能會與PCR引物結合...
胎牛血清在細胞培養中扮演著至關重要的角色，其安全性直接影響到實驗結果的準確性和可靠性。病毒檢測是確保胎牛血清安全性的重要環節，以下是對胎牛血清病毒檢測與安全性的詳細分析：一、胎牛血清的病毒檢測檢測內容：胎牛血清的病毒檢測通常涵蓋一系列可能存在的病毒，如牛副流感3型病毒（PI-3）、牛病毒性腹瀉病毒（BVD）、牛細小病毒等。這些病毒一旦存在于血清中，將對宿主細胞造成嚴重的損害，甚至威脅實驗人員...
培養基是否需要避光儲存？培養基不可以經陽光暴曬，短暫的照射燈光不會有明顯危害。一、培養基避免暴曬儲存和使用的必要性1. 防止成分降解：培養基中的某些成分，如維生素、氨基酸等，在光照下容易發生降解，導致營養物質的濃度下降。這些成分對細胞的生長和繁殖十分重要，因此避光儲存和使用可以確保這些成分保持較高的濃度，為細胞提供充足的營養支持。2. 避免細菌污染：光照還可能促進某些細菌的生長，這些細菌可能...
大阪大學的研究人員發現，“腸道監視”細胞中的GPR31路徑檢測細菌代謝物并觸發免疫反應，為藥物開發、疫苗和益生菌對抗感染開辟了新的可能性。人體腸道是有益微生物的家園，這些微生物被稱為微生物群，它們產生被稱為代謝物的分子。人們越來越認識到這些代謝物在支持我們健康方面的作用。我們體內的一組蛋白質，被稱為G蛋白偶聯受體（GPCRs），可以檢測這些代謝物，并觸發重要的免疫反應和其他途徑。然而，目前尚...
qPCR（實時熒光定量核酸擴增檢測）檢測試劑盒的檢測限因試劑盒類型、目標病原體或污染物以及制造商的不同而有所差異。以下介紹的是大多數單位用的德國MB qPCR檢測試劑盒及其檢測限的概述： 支原體qPCR檢測試劑盒涵蓋范圍：高特異性的德國MB qPCR檢測試劑盒（經典法）可涵蓋所有可能感染細胞的支原體物種，包括歐洲藥典規定的9種支原體，甚至能檢測到至少107種支原體物種。 檢測限：經典法：MB...
“10CFU/100ml”這一標準的制定涉及多個方面，包括藥品和水的微生物控制標準等。以下是對該標準制定過程的詳細解釋：一、背景在藥品和水的生產過程中，微生物的控制至關重要。為了確保產品的質量和安全性，各國藥典和相關機構都制定了嚴格的微生物控制標準。其中，“10CFU/100ml”這一標準在多個領域都有應用。二、制定過程藥典標準：在藥品生產領域，特別是無菌制劑的生產中，微生物的控制標準非常嚴...
在體外細胞培養過程中，濕度是一個至關重要的環境因素，對細胞的生長、形態維持及功能發揮具有深遠的影響。細胞培養環境的濕度控制不僅涉及水分的保持，還關系到培養箱內氣體交換的平衡，以及細胞與外界環境的相互作用。本文將詳細探討體外培養細胞對濕度的具體要求及其重要性。一、濕度對細胞生長的影響細胞在體外培養時，適宜的濕度有助于維持其正常的生理功能和代謝活動。濕度過低會導致培養液快速蒸發，不僅影響培養液的...
