PCR實驗中DNA/RNA污染的危害主要體現在以下幾個方面:
一、實驗結果的準確性受影響
錯誤的數據解讀:在RNA相關的實驗中,如果DNA污染了RNA樣本,可能導致研究者錯誤地解讀實驗結果。例如,在基因表達分析中,DNA污染可能干擾RNA的逆轉錄和PCR擴增過程,導致對基因表達水平的錯誤估計。
影響基因表達分析:DNA污染可能掩蓋或模擬RNA的表達模式,使得研究者對基因功能和調控機制的理...
南美胎牛血清并非只有烏拉圭胎牛血清表現出色,但烏拉圭胎牛血清確實在全球范圍內享有較高的聲譽,這主要得益于烏拉圭在多個方面的優勢。首先,烏拉圭擁有優質的胎牛血清原料。烏拉圭的牛只養殖規模龐大,且牧場管理高效、集中,通過實施精細化的管理策略,有效遏制了動物疫病,從而保障了胎牛血清的高品質與安全性。這些優質的原料為烏拉圭胎牛血清的生產提供了堅實的基礎。其次,烏拉圭在胎牛血清的生產與質量標準方面也非...
11月13日,國際學術期刊Nature Genetics在線發表了中國科學院分子細胞科學**創新中心(生物化學與細胞生物學研究所)高棟研究組的最新研究成果:“JAK/STAT signaling maintains an intermediate cell population during prostate basal cell fate determination”。該研究通過一系列增強...
PCR(聚合酶鏈式反應)技術是一種廣泛應用于基因工程、分子生物學和遺傳學等領域的分子生物學技術。其核心在于通過特定的循環過程,將微量的DNA片段進行指數級擴增。這一過程中,水不僅作為反應溶液的主要成分,還發揮著稀釋試劑、調節反應體系pH值、提供反應所需的離子和酶等多重作用。因此,在PCR實驗中,使用高純度和無菌的水是至關重要的,尤其是PCR級別的水。高純度確保準確性PCR反應需要高純度的水來...
PCR實驗,即聚合酶鏈式反應實驗,是一種用于特異性擴增DNA片段的分子生物學技術。在進行PCR實驗時,需要注意多個問題和細節,以下是對這些問題及其原因的詳細歸納:
一、試劑與材料的選擇與準備
試劑的質量:
確保所有試劑(如ddH2O、引物、DNA模板、商業化的預混DNA酶等)均為高質量且未過期。
不同品牌的試劑性能可能有所不同,因此需要根據實驗需求選擇合適的試劑。
引物的設計:
引...
剛發表在《自然通訊》上的兩篇獨立研究論文報道了一個發現——在能量生產和核苷酸合成中發揮作用的代謝酶,在細胞核內承擔了意想不到的“第二份工作”:協調細胞分裂和DNA修復等關鍵功能,它不僅挑戰了細胞生物學中長期存在的生物學范式,而且為癌癥治療開辟了新的途徑,特別是針對侵襲性腫瘤,如三陰性乳腺癌(TNBC)。幾十年來,生物學教科書對細胞功能進行了整齊的劃分。線粒體是細胞的動力源,細胞質是蛋白質合成...
南美胎牛血清(Fetal Bovine Serum, FBS)作為細胞培養、藥物開發以及生物醫學研究中的重要生物試劑,其質量和來源對于科研結果的準確性和可靠性很重要。南美地區,特別是烏拉圭、巴西和阿根廷,是全球胎牛血清的主要產地,這些國家以其嚴格的動物健康管理和優質的血清生產標準而聞名。烏拉圭:高效畜牧業與嚴格疫病管控烏拉圭,盡管國土面積相對較小(約17.62萬平方公里),但其畜牧業卻很高效...
番茄是一種重要的設施蔬菜,設施番茄生產中的弱光問題影響番茄的產量和果實品質。研究表明紫外光UV-B信號通路能夠有效的抑制番茄的弱光徒長問題,改善番茄果實代謝,增強番茄果實著色。然而紫外光UV-B信號轉導調控番茄發育和代謝的機理有待深入研究。近日,上海交通大學農業與生物學院尹若賀實驗室與合作者在The Plant Journal雜志發表了題為SlSPA3 regulates the nucle...
在藥物發現中,靶向蛋白質降解是一種選擇性地消除致病蛋白質的方法。加州大學河濱分校的一個科學家團隊使用了一種新方法來識別針對Pin1的蛋白質降解物,Pin1是一種參與胰腺癌發展的蛋白質。該團隊今天在《美國國家科學院院刊》上報告說,他們已經設計出了不僅能與Pin1緊密結合,而且能導致其不穩定和細胞降解的藥物——這一發現可能為新的癌癥治療鋪平道路。在UCR醫學院生物醫學科學教授Maurizio P...
在細胞培養實驗中,支原體污染是一個普遍且棘手的問題。據估計,細胞培養中的支原體污染率可高達15-35%,甚至在某些情況下達到63%。由于支原體感染難以通過肉眼檢測,且對細胞生長率影響較小,因此很容易被忽視,從而影響實驗結果的可靠性。本文旨在探討如何有效預防細胞實驗超凈工作臺內發生支原體污染。1. 控制環境污染環境是支原體污染的主要來源之一。因此,控制環境污染是預防支原體污染的首要任務。細胞培...
胎牛血清作為培養基的重要添加成分,在細胞培養過程中起著提供生長因子、激素、微量元素等營養物質的作用,對于細胞的生長、增殖和分化十分重要。我們都知道,血清的血源產地不同,胎牛血清的價格差異比較大。這些差異巨大的血清在成分、功能上有哪些不同?該如何選擇血源不同的胎牛血清? 目前,進口的胎牛血清產地主要以澳洲、新西蘭、南美等地為主。與澳洲和新西蘭等相比,在歷史上,南美曾出現過大規模的口蹄疫、瘋牛病...
卡羅林斯卡學院細胞和分子生物系的研究人員在人類細胞如何產生能量方面有了重大發現。他們的研究發表在EMBO雜志上,揭示了線粒體如何轉移RNA (tRNA)分子的詳細機制,這對能量產生至關重要。線粒體被稱為細胞的“發電站”,它需要經過適當處理的tRNA來制造蛋白質以提供能量。tRNA加工中的問題可能導致嚴重的線粒體疾病。直到現在,線粒體中tRNA成熟的確切過程還沒有被很好地理解。“我們的研究在分...
在輔助生殖技術中,成熟的卵細胞或卵母細胞對受精至關重要。然而,一些“脫落”的卵母細胞,或那些缺乏保護性顆粒細胞層的卵母細胞,不能成熟。現在,在信州大學研究人員的一項新研究中,研究小組已經開發出一種在實驗室中從這些脫落的卵母細胞中培養成熟卵母細胞的方法。這種創新的方法有望克服生殖科學中的重大挑戰,標志著生育研究的重大進步。輔助生殖技術(ART)是一種從卵巢中取出卵子,與體外精子結合,然后將胚胎...
含EDTA的胰酶和普通胰酶各有其特點和適用場景,無法一概而論哪個更好,而是需要根據具體實驗或應用需求來選擇。含EDTA的胰酶成分與特性:含EDTA的胰酶是在普通胰酶的基礎上添加了EDTA(乙二胺四乙酸)成分。EDTA是一種螯合劑,能夠與金屬離子(如Mg2?、Ca2?等)形成穩定的絡合物,有助于降低細胞間的粘附力,從而增強胰酶的消化效果。消化效率:由于EDTA的作用,含EDTA的胰酶在消化細胞...
在細胞培養的實驗過程中,懸浮細胞的成簇生長是一種常見的現象,這一現象背后蘊含著復雜的生物學機制和多方面的培養因素。本文將從細胞本身生長特性、培養條件以及操作技術等多個角度,探討體外培養的懸浮細胞成簇生長的原因及其影響。細胞本身生長特性首先,細胞本身的生長特性是導致懸浮細胞成簇生長的重要因素之一。有些細胞天生具有抱團生長的特性,例如NCI-H716人結直腸腺癌細胞和NK92MI細胞等,這些細胞...
在細胞培養過程中,貼壁細胞的大面積脫壁是一個常見且需要重視的問題。細胞的脫壁不僅影響細胞的生長和增殖,還可能導致實驗失敗,甚至影響后續的研究結果。本文將從多個方面探討貼壁細胞脫壁的原因,并提出相應的解決方案。一、細胞質量不佳細胞本身的健康狀況是影響其貼壁能力的重要因素。細胞老化、受到細菌或真菌污染、細胞培養液中營養物質不足等,都可能導致細胞質量下降,進而出現脫壁現象。因此,在細胞培養前,應確...
“RNA世界”假說認為,地球上最早的生命可能是以RNA為基礎的。在許多方面與DNA相似的單鏈分子;就像一些現代病毒。這是因為,像DNA一樣,RNA可以攜帶遺傳信息,但像蛋白質一樣,它也可以作為一種酶,啟動或加速反應。而少數RNA酶的活性,稱為核酶,在逐個測試的基礎上,通過計算預測,從細菌到植物和動物的生物體中存在著數千種以上的基因。現在,賓夕法尼亞州立大學的研究人員開發了一種新方法,可以在一...
在細胞培養過程中,貼壁細胞復蘇后大量漂浮是一個常見且令人困擾的問題。這一現象不僅影響了細胞的生長和增殖,還可能導致實驗失敗。原因分析1. 傳代前細胞密度過大:細胞在復蘇后,如果傳代前的細胞密度過大,即細胞融合度超過80%,可能會導致傳代后細胞漂浮。這是因為過高的細胞密度會增加細胞間的接觸抑制,影響細胞的貼壁能力。2. 細胞狀態不佳:細胞在凍存和復蘇過程中,可能會受到各種因素的影響,導致細胞狀...
含EDTA的胰酶和普通胰酶在細胞消化過程中具有不同的特性和作用機制,主要體現在以下幾個方面:一、成分差異含EDTA的胰酶:除了含有胰酶這一主要成分外,還添加了EDTA(乙二胺四乙酸)。EDTA是一種金屬螯合劑,能夠與細胞表面的Ca2?或Mg2?等二價金屬陽離子結合,從而破壞細胞間的連接,促進細胞的解離。普通胰酶:主要成分為胰酶,它能夠水解細胞間的蛋白質,破壞細胞間的連接,使細胞從培養皿或培養...
剛復蘇的細胞在特定情況下可以使用支原體清除劑。支原體清除劑通常用于處理被支原體污染的細胞培養物,通過抑制支原體DNA的復制和蛋白合成來達到清除支原體的效果。對于剛復蘇的細胞,如果確認存在支原體污染,并且污染程度嚴重,使用支原體清除劑可能是一個有效的搶救措施。然而,在使用支原體清除劑時,需要注意以下幾點:確認污染:在使用支原體清除劑之前,應首先通過支原體檢測試劑盒等方法確認細胞確實存在支原體污...
賓州大學公園“RNA世界”假說提出,地球上最早的生命可能是基于RNA——一種在許多方面與DNA相似的單鏈分子——就像一些現代病毒一樣。這是因為,像DNA一樣,RNA可以攜帶遺傳信息,但像蛋白質一樣,它也可以作為一種酶,啟動或加速反應。雖然一些核糖核酸酶(核糖酶)的活性已經在個案基礎上進行了測試,但通過計算預測,從細菌到植物和動物的生物體中存在著數千種以上的核糖核酸酶。現在,賓夕法尼亞州立大學...
在DNA實驗過程中,確保DNA樣本的完整性和高效擴增是實驗成功的關鍵。然而,DNA樣本在反應管中的非特異性吸附一直是影響實驗結果準確性的重要因素。為了解決這一問題,科學家們研發了低結合反應管,這種特殊設計的反應管能夠顯著減少DNA在管壁上的吸附,從而提高實驗的效率和準確性。一、低結合反應管的材料與設計低結合反應管的核心在于其特殊的材料與設計。這些反應管通常采用低吸附材料制成,如特殊的雙鏈聚合...
II型炎癥是以II型細胞因子(如 IL-4、IL-5 和 IL-13)的分泌和嗜酸性粒細胞(Eosinophils)的浸潤為主要特征的炎癥過程。過度的II型炎癥可以導致一系列病理過程,如哮喘、過敏性皮炎和肺纖維化等。隨著研究的進展,不依賴抗原識別過程的黏膜天然免疫細胞ILC2s(II型固有淋巴樣細胞)越來越被認為是早期啟動II型炎癥的核心免疫細胞群。因此,鑒定調節ILC2s應答的關鍵分子對于...
在生物技術和制藥行業中,支原體檢測是確保產品質量和安全性至關重要的一環。傳統的支原體檢測方法,如培養法和指示細胞培養法,因其檢測周期長、靈敏度不足等問題,逐漸無法滿足現代生產的高效率和高質量要求。因此,核酸擴增技術(NAT)作為一種快速、靈敏的支原體檢測方法,正逐步被行業接受和應用。然而,根據中國藥典、美國藥典、歐洲藥典和日本藥典的建議,NAT法在替代傳統方法前,必須經過嚴格的方法學驗證。 ...
近期,我校河南省腦靶向生物納米藥物重點實驗室的研究論文以“Targeted protein degradation via cellular trafficking of nanoparticles”為題在Nature Nanotechnology(影響因子38.1)期刊上發表,該研究發現抗體、多肽修飾的納米顆粒在細胞運輸過程中自發地會啟動靶向蛋白降解,基于此提出了一種基于納米顆粒的靶向蛋白...